[發明專利]一種檸檬酸發酵菌絲體水解液回用于檸檬酸發酵的方法

有效

• 申請號: 201710992518.1
• 申請日: 2017-10-23
• 公開（公告）號: CN107868803B
• 公開（公告）日: 2021-03-23
• 發明（設計）人: 寇光智;李昌濤;蔣水星;孔玉;魏彩霞
• 申請（專利權）人: 日照金禾博源生化有限公司
• 主分類號: C12P7/48
• 分類號: C12P7/48
• 代理公司: 濟南舜源專利事務所有限公司 37205
• 代理人: 趙斌;苗峻

1.一種檸檬酸發酵菌絲體水解液回用于檸檬酸發酵的方法，其特征在于，將檸檬酸發酵菌絲體水解后回用于其發酵培養基中，發酵培養基組成按重量百分比計，配比如下：黑曲霉菌絲體水解液：5-15%，麩皮水解液：5-20%，玉米液化液清液：65-80%，玉米液化液：10-25%；具體步驟如下：

1）黑曲霉菌絲體收集工序：將發酵結束的檸檬酸發酵液經過濾或壓濾分離后收集黑曲霉菌絲體；

2）黑曲霉菌絲體水解液制備工序：將黑曲霉菌絲體進行破碎處理，再加入溶菌酶水解制備黑曲霉菌絲體水解液；

3）麩皮水解液制備工序：將麩皮粉碎后加水調漿，再加入淀粉酶、纖維素酶和蛋白酶進行水解制備麩皮水解液；

4）玉米液化工序：將玉米粉漿輸送至噴射液化裝置采用連續噴射液化工藝進行液化；

5）玉米液化液清液制備工序：將步驟4）方法得到的玉米液化液進行過濾，即得玉米液化液清液；

6）發酵培養基制備工序：按以下配方向發酵罐中加入各組分，按質量百分比計，各組分占比為：黑曲霉菌絲體水解液：5-15%，麩皮水解液：5-20%，玉米液化液清液：65-80%，玉米液化液：10-25%；

然后通過蒸汽升溫消毒，升至80-115℃，恒溫15-30分鐘，再降溫至35-38℃，即制備得到發酵培養基；

7）發酵工序：將培養成熟的檸檬酸發酵種子液接入發酵培養基中，控制發酵溫度為35-38℃，進行發酵直至發酵終了；

步驟2）所述的黑曲霉菌絲體水解液制備的具體方法為：黑曲霉菌絲體直接經球磨機粉碎處理后按照質量體積比1:3-5加水混勻或按照質量體積比1:3-5加水調漿后通過膠體磨或均質機破碎處理，然后按照每克菌絲體加入5-20酶單位的溶菌酶，于150-300轉/min，35-40℃條件下水解3-12h，即得黑曲霉菌絲體水解液。

2.根據權利要求1所述的一種檸檬酸發酵菌絲體水解液回用于檸檬酸發酵的方法，其特征在于，步驟3）所述的麩皮水解液制備，具體為：將麩皮采用粉碎機粉碎，過100目篩，然后按照質量體積比1:2-5加入水，調漿后按照每克麩皮加入5-10酶單位纖維素酶、5-10酶單位蛋白酶和5-10酶單位淀粉酶于40-90℃水解2-6h，即得麩皮水解液。

3.根據權利要求1所述的一種檸檬酸發酵菌絲體水解液回用于檸檬酸發酵的方法，其特征在于，步驟4）所述的玉米液化過程具體為：采用粉碎機將玉米粉碎，過40目篩通過率≥50%，隨后按照質量體積比玉米：水為1:2.8-3.2的比例加55-65℃的水調漿，隨后按每克玉米粉加入10-20酶單位的耐高溫α-淀粉酶，經二次連續噴射液化，噴射溫度為80-130℃，時間為2-6小時，即得玉米液化液。

4.根據權利要求1所述的一種檸檬酸發酵菌絲體水解液回用于檸檬酸發酵的方法，其特征在于，步驟5）所述的過濾方法為采用板框過濾機或臥螺離心機進行過濾。

5.根據權利要求1所述的一種檸檬酸發酵菌絲體水解液回用于檸檬酸發酵的方法，其特征在于，步驟7）所述的檸檬酸發酵液接種量為5-15%，使菌球密度達到2-5*10⁴個/ml。