[發明專利]利用人工淋巴結技術生產單克隆抗體的方法在審
| 申請號： | 201710992460.0 | 申請日： | 2017-10-23 |
| 公開（公告）號： | CN107556378A | 公開（公告）日： | 2018-01-09 |
| 發明（設計）人： | 尹杰;唐勇 | 申請（專利權）人： | 成都微康生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C07K16/00 | 分類號： | C07K16/00 |
| 代理公司： | 北京元本知識產權代理事務所11308 | 代理人： | 黎昌莉 |
| 地址： | 610064 四川省成都市高新*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 利用 人工 淋巴結 技術 生產 單克隆抗體 方法 | ||
1.利用人工淋巴結技術生產單克隆抗體的方法，其特征在于，包括以下步驟：
1)人工淋巴結的制備；
2)將人工淋巴結移植到免疫缺陷型小鼠體內，給予目標抗原免疫刺激，獲得表達目標抗體的B淋巴細胞；
3)分離出步驟2)獲得的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，經篩選獲得產生特異性抗體的單克隆細胞，得單克隆抗體。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)中人工淋巴結的制備為：將包被了基質細胞和樹突狀細胞的生物材料移植到小鼠體內，經過目標抗原的免疫后，得人工淋巴結。
3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟1)中生物材料的移植為移植到小鼠腎盂囊下。
4.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟1)中的小鼠為BALB/c小鼠；經過目標抗原的免疫分4次完成。
5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，免疫前三次免疫的途徑選自皮下、肌肉、腹腔或靜脈注射的任一方法，最后一次加強免疫選擇腹腔注射或靜脈注射。
6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2)中免疫缺陷型小鼠為SCID小鼠。
7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2)中人工淋巴結的移植為移植到免疫缺陷小鼠的腎臟。
8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2)中人工淋巴結移植到免疫缺陷型小鼠體內后分兩次給予目標抗原免疫刺激，18～25天后分離產生的B淋巴細胞。
9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，還包括步驟：4)將步驟3)中篩選的產生特異性抗體的單克隆細胞經擴增、重懸后計數，注射入小鼠腹腔產生腹水，純化后得單克隆抗體。
10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于，所述注射入小鼠腹腔的單克隆細胞的濃度為1×107～1×108/ml，每只小鼠的注射量為0.08～0.12ml。
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