[發(fā)明專利]一種雙魚顆粒GC定量指紋圖譜的建立方法及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710986852.6
• 申請日: 2017-10-20
• 公開（公告）號: CN107748217B
• 公開（公告）日: 2019-10-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蕭偉;林夏;崔培超;秦建平;胡軍華;黃文哲;胡晗緋;王振中
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司
• 主分類號: G01N30/86
• 分類號: G01N30/86;G01N30/68;G01N30/06
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責(zé)任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤;邢賢冬

本發(fā)明公開了一種雙魚顆粒GC指紋圖譜的建立方法，包括：制備供試品溶液：取雙魚顆粒，研細(xì)，將雙魚顆粒粉末置于燒瓶中，以水和正己烷為提取溶劑，采用揮發(fā)油提取器提取，分取正己烷層，過濾，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；分別將至少10批雙魚顆粒供試品溶液注入氣相色譜檢測，記錄色譜圖，采用相似度軟件對色譜圖進(jìn)行分析，標(biāo)定出12個(gè)共有特征峰，得到雙魚顆粒指紋圖譜。本發(fā)明方法具有良好的精密度、線性關(guān)系、穩(wěn)定性、重復(fù)性，回收率高，耐用性良好；建立的雙魚顆粒揮發(fā)性成分指紋圖譜及2種成分的含量測定方法為雙魚顆粒的質(zhì)量控制提供依據(jù)；該方法簡便可行、快速準(zhǔn)確，可以作為評價(jià)雙魚顆粒質(zhì)量的有效方法。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于化學(xué)分析領(lǐng)域，涉及一種雙魚顆粒GC指紋圖譜的建立方法。

背景技術(shù)

雙魚顆粒(SG)處方由魚腥草、金銀花、赤芍、艾葉和薄荷5味藥組成，為江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司研制的中藥復(fù)方6類新藥，具有辛涼解表、清熱解毒之功效，用于外感風(fēng)熱型普通感冒，癥見發(fā)熱頭痛、全身酸痛、鼻塞、流涕、咳嗽、咳痰、咽喉發(fā)癢、口干而渴、咽喉紅腫疼痛、舌紅、脈數(shù)等癥。

雙魚顆粒為復(fù)方制劑，化學(xué)成分復(fù)雜，有效成分包括苷類、單萜類、酚酸類、揮發(fā)油，并含大量輔料如β-環(huán)糊精。目前，雙魚顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中對揮發(fā)性成分桉油精、薄荷腦和甲基正壬酮進(jìn)行了氣相鑒別，并對綠原酸和芍藥苷進(jìn)行了HPLC含量測定。鑒于僅對2個(gè)成分進(jìn)行含量控制，故而進(jìn)行了基于指紋圖譜分析和多成分同時(shí)定量的雙魚顆粒質(zhì)量評價(jià)研究，該研究主要是采用HPLC對本品中的大中等極性成分進(jìn)行指紋圖譜和含量測定研究。然而對于本品中的揮發(fā)性成分僅有鑒別控制，沒有含量測定指標(biāo)和整體性控制。由于雙魚顆粒檢測目標(biāo)成分復(fù)雜，且又被輔料β-環(huán)糊精包合。以目前的檢測方法尚無法對雙魚顆粒中的揮發(fā)性有效成分進(jìn)行有效定量及整體性控制。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種雙魚顆粒GC定量指紋圖譜的建立方法，主要對揮發(fā)性成分進(jìn)行指紋圖譜研究，對其中的主要活性成分桉油精和薄荷腦進(jìn)行了含量測定，以達(dá)到整體性控制的目的。

本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

一種雙魚顆粒GC指紋圖譜的建立方法，包括以下步驟：

步驟(1)、制備供試品溶液：取雙魚顆粒，研細(xì)，將雙魚顆粒粉末置于燒瓶中，以水和正己烷為提取溶劑，采用揮發(fā)油提取器提取，自沸騰開始計(jì)時(shí)60～120分鐘，冷卻，分取正己烷層，用正己烷涮洗揮發(fā)油提取器2～3次，合并正己烷，加正己烷定容至25mL，搖勻，過濾，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；其中，所述的雙魚顆粒粉末、水和正己烷的用量比為10g:250mL:2～5mL；

制備對照品溶液：將桉油精、薄荷腦、甲基正壬酮與正己烷混合得到對照品溶液；

步驟(2)、分別將對照品溶液與至少10批雙魚顆粒供試品溶液注入氣相色譜檢測，記錄色譜圖，對色譜圖進(jìn)行分析，標(biāo)定出12個(gè)共有特征峰，得到雙魚顆粒指紋圖譜；

其中，氣相色譜條件為：Agilent DB-1毛細(xì)管柱(30m×0.32mm，0.25μm)；進(jìn)樣量為1μL；分流比為5:1～50:1；進(jìn)樣口溫度為230℃；以氮?dú)鉃檩d氣，氮?dú)饬魉?.5～0.7L/min；FID檢測器溫度為250℃；升溫程序?yàn)椋褐鶞兀?8～82℃保持2分鐘，再以8℃/min升至112℃，保持4分鐘，再以2℃/min升至120℃，保持6分鐘；再以20℃/min升至250℃。

步驟(1)中，優(yōu)選的，所述的供試品溶液的制備方法為：取裝量差異項(xiàng)下的雙魚顆粒，混勻，研細(xì)，取10.0g，精密稱定，置于500mL燒瓶中，加入玻璃珠數(shù)顆，以水和正己烷為提取溶劑；自沸騰開始計(jì)時(shí)60～90分鐘后，冷卻，分取正己烷層，用正己烷涮洗揮發(fā)油提取器2次，合并正己烷于25mL量瓶內(nèi)，加正己烷定容至刻度，搖勻，過濾，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；其中，所述的雙魚顆粒粉末、水和正己烷的用量比為10g:250mL:3mL。