[發(fā)明專利]檢測耐萬古霉素基因的引物組合物、探針組合物、試劑盒,及其應用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710984842.9 | 申請日: | 2017-10-20 |
| 公開(公告)號: | CN109706254A | 公開(公告)日: | 2019-05-03 |
| 發(fā)明(設計)人: | 周騁;郝輝 | 申請(專利權)人: | 北京愛普益生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/689 | 分類號: | C12Q1/689;C12Q1/04;C12Q1/14;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京三高永信知識產權代理有限責任公司 11138 | 代理人: | 梁洪文 |
| 地址: | 100176 北京市大興區(qū)*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 堿基序列 萬古霉素 引物組 基因 引物組合物 耐藥蛋白 上游引物 下游引物 探針組合物 試劑盒 物質基礎 生物體 種檢測 檢測 應用 | ||
1.一種擴增耐萬古霉素基因的引物組合物,其特征在于,所述引物組合物包括:
特異于編碼萬古霉素耐藥蛋白A的基因的引物組、特異于編碼萬古霉素耐藥蛋白B的基因的引物組、以及特異于編碼萬古霉素耐藥蛋白M的基因的引物組中的至少一種;
其中,
所述特異于編碼萬古霉素耐藥蛋白A的基因的引物組包括:堿基序列如SEQ ID NO:1所示的上游引物、以及堿基序列如SEQ ID NO:2所示的下游引物,
所述特異于編碼萬古霉素耐藥蛋白B的基因的引物組包括:堿基序列如SEQ ID NO:3所示的上游引物、以及堿基序列如SEQ ID NO:4所示的下游引物,以及
所述特異于編碼萬古霉素耐藥蛋白M的基因的引物組包括:堿基序列如SEQ ID NO:5所示的上游引物、以及堿基序列如SEQ ID NO:6所示的下游引物。
2.一種檢測耐萬古霉素基因的探針組合物,其特征在于,所述探針組合物包括:
特異于編碼萬古霉素耐藥蛋白A的基因的探針,特異于編碼萬古霉素耐藥蛋白B的基因的探針,以及特異于編碼萬古霉素耐藥蛋白M的基因的探針中的至少一種,
所述特異于編碼萬古霉素耐藥蛋白A的基因的探針的堿基序列如SEQ ID NO:9所示,
所述特異于編碼萬古霉素耐藥蛋白B的基因的探針的堿基序列如SEQ ID NO:10所示,以及
所述特異于編碼萬古霉素耐藥蛋白M的基因的探針的堿基序列如SEQ ID NO:11所示。
3.一種檢測耐萬古霉素基因的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包括:
權利要求1所述的引物組合物,
權利要求2所述的探針組合物,
KCl,
MgCl2,
Tris-HCl,
dATP,
dUTP,
dCTP,
dGTP,
DNA聚合酶,以及
UNG酶,
所述DNA聚合酶為Taq酶。
4.根據(jù)權利要求3所述的試劑盒,其特征在于,
所述堿基序列如SEQ ID NO:1所示的上游引物的濃度為100-500nM、
所述堿基序列如SEQ ID NO:2所示的下游引物的濃度為100-500nM、
所述堿基序列如SEQ ID NO:3所示的上游引物的濃度為100-500nM、
所述堿基序列如SEQ ID NO:4所示的下游引物的濃度為100-500nM、
所述堿基序列如SEQ ID NO:5所示的上游引物的濃度為100-500nM、以及
所述堿基序列如SEQ ID NO:6所示的下游引物的濃度為100-500nM,
所述特異于編碼萬古霉素耐藥蛋白A的基因的探針的濃度為100-500nM、
所述特異于編碼萬古霉素耐藥蛋白B的基因的探針的濃度為100-500nM、以及
所述特異于編碼萬古霉素耐藥蛋白M的基因的探針的濃度為100-500nM,
所述KCl的濃度為10-100mM,
所述MgCl2的濃度為1-5mM,
所述Tris-HCl的濃度為5-50mM,
所述dATP的濃度為50-400μM,
所述dUTP的濃度為100-500μM,
所述dCTP的濃度為50-400μM,
所述dGTP的濃度為50-400μM,
所述Taq酶的濃度為0.5-5U/μL,以及
所述UNG酶的濃度為0.1-1U/μL。
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