[發明專利]一種利用核磁共振對葡萄糖聚合物支化度測定的方法

在審

• 申請號: 201710982806.9
• 申請日: 2017-10-12
• 公開（公告）號: CN108020576A
• 公開（公告）日: 2018-05-11
• 發明（設計）人: 王藝鳴;王文彥;孫建
• 申請（專利權）人: 青島力騰化工醫藥研究有限公司
• 主分類號: G01N24/08
• 分類號: G01N24/08
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及對葡萄糖聚合物的支化度的測定方法，尤其是一種利用核磁共振對葡萄糖聚合物支化度測定的方法，具體包括：將待測葡萄糖聚合物通過溶劑溶解形成溶液，利用核磁共振儀測定上述溶液的氫譜或碳譜信號積分強度，根據上述氫譜或碳譜信號積分強度分析計算支化度。本發明的有益效果是：通過核磁共振方法對葡萄糖聚合物進行測定，能夠直接獲取其結構的信息，突破了傳統化學方法的局限性，通過α?1，6連接中葡萄糖殘基的C1中糖苷質子信號積分進行計算得出支化度值，或通過α?1，6連接中葡萄糖殘基的C6信號積分進行計算得出支化度值，能夠有效提高測定精度和簡化測定步驟。

技術領域：

本發明涉及對葡萄糖聚合物的支化度的測定方法，尤其是一種利用核磁共振對葡萄糖聚合物支化度測定的方法。

背景技術：

淀粉作為生物大分子多糖混合物，天然淀粉一般含有兩種組分：直鏈淀粉(amylose)和支鏈淀粉(amylopectin)，支鏈淀粉線性段以α-1，4連接，分支點以α-1，6連接，對淀粉結構測定的方法現有的文獻報道有多種，大致可分為兩類：傳統的化學方法和波譜學法。

傳統的化學方法大致有水解、氧化、甲基化、smith降解等，波譜學法大致分為：紫外分光光度法、紅外光譜法等。傳統化學方法對淀粉的結構分析尤其是對淀粉連接方式的測定步驟繁瑣，不易操作，不同方法間測定結構有較大的差異，重現性差。

波譜學方法中紫外分光光度法主要以直鏈淀粉與支鏈淀粉與碘的復合物最大吸收波長的差異確定其比例，不適合分子量相對較小的葡萄糖聚合物；紅外光譜法主要用于對淀粉基團的辨認，不能用于支化度的測定。

艾考糊精(α-1，4聚吡喃葡萄糖)是支鏈玉米淀粉的水解產物，艾考糊精和其他電解質合用在臨床上用于腹膜透析。Baxter Healthcar Corporation公司生產的艾考糊精腹膜透析液(商品名EXTRANEAL)于2004年12月20日被美國FDA批準上市。

艾考糊精被α-淀粉酶代謝為具有較低程度的寡糖聚合(DP)，包括麥芽糖 (DP2)，麥芽三糖(DP3)，麥芽四糖(DP4)和更高分子量多糖。

隨著葡萄糖聚合物中1，6-連接產物的增加，容易在其體內蓄積而造成傷害，因此美國專利US6077836中公開了一種艾考葡萄糖聚合物的制備方法，其所用原料為干凈預先洗滌的淀粉且α-1，6連接小于5％。美國FDA批準的艾考葡萄糖聚合物的說明書的“描述項”明確指出：艾考葡萄糖聚合物主鏈為α-1，4連接的葡萄糖聚合物，支鏈為1，6-連接，并且1，6-連接物不得超過10％。由此可見艾考葡萄糖聚合物1，6-連接的測定對于產品的安全性就變得極為重要。

發明內容：

基于上述理由，有必要提供一種葡萄糖聚合物支化度的測定方法，以彌補對于艾考葡萄糖聚合物1，6-連接物所占比例沒有一種有效測定的方法。

本發明為解決上述技術問題所采用的技術方案是：

本發明公開了一種利用核磁共振對葡萄糖聚合物支化度測定的方法，具體包括：

對待測葡萄糖聚合物通過溶劑溶解形成溶液，所述溶劑為氘代DMSO和/或重水，并且優選重水；

使用核磁共振儀測定上述溶液的氫譜或碳譜的信號積分強度；

根據上述氫譜和信號積分強度分析；

計算支化度，氫譜計算：支化度＝供試品α-1，6連接中葡萄糖殘基的C1中糖苷質子信號積分÷供試品C1中糖苷質子信號積分之和×100％。