[發(fā)明專利]一種從L-羥脯氨酸發(fā)酵液中分離純化L-羥脯氨酸的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710978595.1
• 申請日: 2017-10-19
• 公開（公告）號: CN107513030B
• 公開（公告）日: 2020-06-16
• 發(fā)明（設計）人: 郭小雷;黃建忠;吳偉斌;翁成光
• 申請（專利權）人: 福建師范大學
• 主分類號: C07D207/16
• 分類號: C07D207/16
• 代理公司: 福州君誠知識產(chǎn)權代理有限公司 35211
• 代理人: 戴雨君

1.一種從L-羥脯氨酸發(fā)酵液中分離純化L-羥脯氨酸的方法，其特征在于：其包括以下步驟：

1）發(fā)酵液菌液分離：調節(jié)L-羥脯氨酸發(fā)酵液的pH為2.0-5.0，然后加入L-羥脯氨酸發(fā)酵液中L-羥脯氨酸質量0.1-2%的絮凝劑，升溫至60-70℃并保溫30min，過濾除菌得到過濾清液；

所述絮凝劑為三氯化鐵、硫酸鋁鉀、硫酸鋁銨或聚丙烯酰胺中的任意一種；

所述過濾除菌采用孔徑為50-200nm的陶瓷膜過濾或采用孔徑為30-100nm的有機管式微濾膜過濾；

2）超濾膜過濾：將上述過濾清液泵入超濾膜系統(tǒng)，得到超濾清液，所述超濾膜的截留分子量為3000-10000D；

3）復合吸附劑處理：將超濾清液預熱后，加入復合吸附劑于60-70℃保溫0.5-1.0 h；所述復合吸附劑為硅藻土與活性炭或活性白土的組合物，所述活性炭的添加量為超濾清液中L-羥脯氨酸質量的10-20%；所述硅藻土的添加量為超濾清液中L-羥脯氨酸質量的0.5-5.0%；所述活性白土的添加量為超濾清液中L-羥脯氨酸質量的0.5-5.0%；

4）除鹽：板框過濾除去復合吸附劑得到一級料液，在一級料液中加入一定量的沉淀劑和螯合劑，保溫攪拌0.5-1h，得到二級料液；

所述沉淀劑為氧化鈣、氫氧化鈣、氯化鈣、氫氧化鋇或氯化鋇中的任意一種，沉淀劑的添加量為超濾清液的0.5-3.0%(w/v)；所述螯合劑為EDTA或EDTA二鈉，螯合劑的添加量為超濾清液的0.01-0.1%(w/v)；

5）真空濃縮結晶：將二級料液板框過濾除去沉淀物，得到的三級料液，先將三級料液真空濃縮至L-羥脯氨酸濃度為0.15-0.25kg/L的一級濃縮液，然后加入一級濃縮液中L-羥脯氨酸質量的0.2-2.0%的晶種，繼續(xù)真空濃縮至L-羥脯氨酸濃度為0.3-0.4kg/L的二級濃縮液，然后降溫至5-15℃，冷卻結晶，離心收集晶體并在溫度50-60℃，真空度-0.08Mpa的條件下雙錐真空干燥，得到成品L-羥脯氨酸。

2.根據(jù)權利要求1所述的一種從L-羥脯氨酸發(fā)酵液中分離純化L-羥脯氨酸的方法，其特征在于：還包括步驟6）和步驟7），

6）大孔樹脂處理：結晶母液經(jīng)大孔吸附樹脂處理，得到大孔樹脂流通液；其中，大孔吸附劑骨架為交聯(lián)聚苯乙烯，其型號是CAD-40，LS-20B，LS-200，LS-300中的任意一種，處理溫度為40-60℃，pH值為4.0-7.0；

7）母液濃縮結晶：將大孔樹脂流通液真空濃縮，加入晶種，冷卻結晶，離心收集晶體，雙錐真空干燥，得到L-羥脯氨酸。