[發(fā)明專利]一種血散薯中微量生物堿單體的分離方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710972717.6
• 申請日: 2017-10-18
• 公開（公告）號: CN107556325B
• 公開（公告）日: 2019-06-11
• 發(fā)明（設計）人: 楊瑞云;周德雄;梁艷;李俊
• 申請（專利權(quán)）人: 廣西師范大學
• 主分類號: C07D491/06
• 分類號: C07D491/06;A61P31/04
• 代理公司: 南寧新途專利代理事務所(普通合伙) 45119
• 代理人: 但玉梅

本發(fā)明提供一種血散薯中微量生物堿單體的分離方法，屬于中草藥提取技術(shù)領域。本發(fā)明的方法所提取的生物堿單體為佐氏千金藤堿和vireakine，包括的步驟為：乙醇回流提取血散薯粉；用石油醚脫脂，用體積比為90:10?20:80的石油醚?乙酸乙酯混合溶液梯度洗脫，再經(jīng)硅膠柱層析分離、經(jīng)硅膠柱層析純化、凝膠色譜柱純化、TLC檢測得到目標物。本發(fā)明為首次從血散薯中分離得到佐氏千金藤堿和vireakine，由于生物堿成分是血散薯的主要活性成分，這些生物堿單體的獲得對于血散薯藥材質(zhì)量標準的把控和藥物研究具有積極意義。

【技術(shù)領域】

本發(fā)明涉及中草藥提取技術(shù)領域，具體涉及一種血散薯中微量生物堿單體的分離方法。

【背景技術(shù)】

血散薯(Stephania dielsiana Y.C.Wu)，為防己科(Menispermaceae)千金藤屬(Stephania)植物，主要分布于廣東、廣西、湖南南部和貴州南部等地區(qū)。血散薯藥性苦、寒，具有清熱解毒、散瘀止痛的功效，主治上呼吸道感染、咽炎、瘡癰、胃痛、胃腸炎、牙痛、神經(jīng)痛、跌打損傷等癥，是廣西民間常用中草藥。

生物堿是血散薯具有抗菌、消炎、鎮(zhèn)痛的主要成分，已知的生物堿單體包括克列班寧，青風藤堿，千金藤堿，去氫千金藤堿，番荔枝寧，左旋一四氫掌葉防己堿，異粉防己堿，頭花千金藤堿和高阿羅莫靈。Zhang Yi等(Zhang Yi等，Chemical Constituents fromStephania dielsiana[J].Chinese Journal of Natural Medicines,2009,7(3):199-202)從血散薯中分離得到12個生物堿成分，包括青風藤堿，千金藤堿，ayuthianine，去氫千金藤堿，cephamorphinanine，aknadinine，鵝掌楸堿，漢防己堿，左旋四氫巴馬汀，紫堇單酚堿，氧代克班寧和norcanelilline。Yecheng Deng等(Yecheng Deng等，Antimicrobialactivity of extract and two alkaloids from traditional Chinese medicinalplant Stephania dielsiana[J].Food Chemistry,2011,124:1556–1560)從血散薯中分離得到兩個主要的生物堿化合物：千金藤堿和克班寧。

隨著血散薯在醫(yī)藥領域的廣泛應用，進一步明確其中生物堿的成分，獲得血散薯生物堿質(zhì)量標準的定位對照品，對于血散薯藥材質(zhì)量標準的把控和藥物研究具有積極意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

本發(fā)明的發(fā)明目的在于：針對上述存在的問題，提供一種血散薯中微量生物堿單體的分離方法，首次從血散薯獲得佐氏千金藤堿和vireakine兩種生物堿。

為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

一種血散薯中微量生物堿單體的分離方法，所指生物堿單體為佐氏千金藤堿和vireakine兩種，所述方法包括以下步驟：

(1)將干燥的血散薯粉碎，利用乙醇回流提取，提取液經(jīng)減壓濃縮、低溫冷凍干燥或噴霧干燥得到血散薯乙醇提取物；

(2)將血散薯乙醇提取物分散在蒸餾水或去離子水中，用石油醚脫脂后棄油相得水相A，水相A使用乙酸乙酯萃取，濃縮萃取液得到EA部分；

(3)將所述EA部分經(jīng)硅膠柱層析分離，用體積比為90:10-20:80的石油醚-乙酸乙酯混合溶液梯度洗脫，得石油醚-乙酸乙酯體積比40:60洗脫液；