[發明專利]輔基連接臂、其合成方法與二泛素的合成方法

有效

• 申請號: 201710970366.5
• 申請日: 2017-10-16
• 公開（公告）號: CN107698474B
• 公開（公告）日: 2019-10-22
• 發明（設計）人: 黃健豐;石景;儲國超
• 申請（專利權）人: 中國科學技術大學
• 主分類號: C07C319/20
• 分類號: C07C319/20;C07C323/12;C07K14/00;C07K1/06;C07K1/02
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 趙青朵

1.一種應用于制備二泛素的具有式(Ⅰ)結構的輔基連接臂的合成方法，包括以下步驟：

A)，將具有式(Ⅱ)結構的化合物與具有式(Ⅲ)結構的化合物在堿性化合物的催化作用下反應，得到具有式(Ⅳ)結構的化合物；

在催化劑的作用下，將具有式(Ⅳ)結構的化合物在甲醇中反應，得到具有式(Ⅴ)結構的化合物；

將N-羥基鄰苯二甲酰亞胺與具有式(Ⅵ)結構的化合物在催化劑的作用下反應，得到具有式(Ⅶ)結構的化合物；

B)，在催化劑的作用下，將具有式(Ⅴ)結構的化合物與具有式(Ⅶ)結構的化合物反應，得到具有式(Ⅷ)結構的化合物；

C)將具有式(Ⅷ)結構的化合物在催化劑的作用下反應，得到具有式(Ⅰ)結構的輔基連接臂；

其中，X₁為鹵素；

R為C1～C5的烷基；

X₂與X₃獨立的選自鹵素。

2.根據權利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述具有式(Ⅲ)結構的化合物為硫代乙酸或硫代丙酸，所述具有式(Ⅵ)結構的化合物為1,2-二溴乙烷或1-溴-2氯乙烷。

3.根據權利要求1所述的合成方法，其特征在于，在得到具有式(Ⅳ)結構的化合物的步驟中，所述堿性化合物為碳酸鉀；在得到具有式(Ⅴ)結構的化合物的步驟中，所述催化劑為濃鹽酸；得到具有式(Ⅶ)結構的化合物的步驟中，所述催化劑為三乙胺；步驟B)中所述催化劑為三乙胺；步驟C)中所述催化劑為水合肼。

4.根據權利要求1所述的合成方法，其特征在于，在得到具有式(Ⅳ)結構的化合物的步驟中，所述具有式(Ⅲ)結構的化合物與所述具有式(Ⅱ)結構的化合物的摩爾比為(1.2～1.5):1，所述堿性化合物與所述具有式(Ⅱ)結構的化合物的摩爾比為(1.2～2):1；在合成具有式(Ⅴ)結構的化合物中，所述催化劑與所述具有式(Ⅳ)結構的化合物的摩爾比為(0.85～1):1；在合成具有式(Ⅶ)結構的化合物中，所述具有式(Ⅵ)結構的化合物與所述N-羥基鄰苯二甲酰亞胺的摩爾比為(4.2～5):1，所述催化劑與所述N-羥基鄰苯二甲酰亞胺的摩爾比為(2.2～3):1；在步驟B)中，所述具有式(Ⅶ)結構的化合物與所述具有式(Ⅴ)結構的化合物的摩爾比為(1.5～2):1，所述催化劑與所述具有式(Ⅴ)結構的化合物的摩爾比為(1.5～2):1；在步驟C)中，所述催化劑與所述具有式(Ⅷ)結構的化合物的摩爾比為(1.5～2):1。

5.一種應用于制備二泛素的具有式(Ⅰ)結構的輔基連接臂，

6.一種二泛素的合成方法，包括以下步驟：

A)，將Ub(1-76)-COOH/X與緩沖液混合，調節pH后再加入CH₂ClCHO水溶液，反應后得到第一產物；其中X為K48C、K6C、K11C、K27C、K29C、K33C或K63C；

B)將所述第一產物、緩沖液與含有輔基連接臂的溶液混合，反應，得到第二產物；將所述第二產物脫巰基保護基，得到第三產物；所述輔基連接臂具有式(Ⅰ)結構；

C)，將Ub(1-76)-CONHNH₂與第一緩沖液混合，預冷卻后加入次硝酸鈉，反應后再加入第二緩沖液，調節pH后反應，然后加入第三產物，再次調節pH后反應，得到第四產物；

D)，將第四產物與緩沖液混合，調節pH后反應，再加入1M三(2-羧乙基)膦溶液，再次用調節pH后反應，得到二泛素；