[發明專利]一種商陸組培快繁方法

在審

• 申請號: 201710967520.3
• 申請日: 2017-10-17
• 公開（公告）號: CN107494281A
• 公開（公告）日: 2017-12-22
• 發明（設計）人: 李正美
• 申請（專利權）人: 李正美
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 玉林市振盛專利商標代理事務所45109
• 代理人: 盧翔飛

技術領域

本發明涉及農業生物技術中植物組織培養的方法，具體地說，涉及一種商陸組培快繁方法。

背景技術

商陸為商陸科植物，主產河南、湖北、安徽等地，于秋季至次春采挖，切成塊或片，曬干或陰干。藥材性狀：根為縱切戒橫切片，大小厚薄不一，外皮黃白色或淡棕色。橫切片為不規則圓形，彎曲不平，邊緣皺縮，直徑3~9cm，厚0.2~1cm；切面淺黃棕色或黃白色，帶粉性，形成多個凹凸不平的同心性環紋。縱切片不規則長方形，彎曲或卷曲，長10~14cm，直徑1~5cm；質堅硬，不易折斷。氣微，味甘淡，久嚼麻舌。主要成份：商陸根含多種三萜皂苷，主要為商陸皂苷E，另含甾醇類化合物，商陸毒素，生物堿，抗炎成分加利果酸及降壓成分氨基丁酸0.06%。功用主治：逐水，通便，散結、解毒。用于水腫，尿少，腹水脹滿，腳氣病，喉痹，癰腫，惡瘡。目前,國內市場上商陸銷量大。因此，合理地開發利用商陸資源,必將產生良好的生態效益、經濟效益和社會效益。目前，未見國外學者對商陸進行研究報道,國內在種子萌發、生物量等方面有一些零散的研究，對其無性繁殖技術研究更是未見報道。因此,為促進商陸繁衍生息,建立商陸無性繁殖體系是很有必要的，商陸良種快繁和規模生產發展也具有重要的現實意義和明顯的經濟效益、社會效益和生態效益。

發明內容

本發明的目的在于提供出一種以帶芽莖段為外植體，經過誘導培養、繼代培養、生根以及煉苗移栽等過程成功地獲得了商陸離體再生植株,建立了商陸的離體快速繁殖技術體系，達到種子種苗純，繁殖快，成苗率高，生長快速，收益高。

本發明的一種商陸組培快繁方法，其特征在于包括以下的步驟：

（1）誘導培養：采集商陸優株根部當年生幼嫩萌芽條,剪取頂部莖段作為外植體,將外植體先用洗潔精浸泡4h,同時用軟毛刷刷洗表面的柔毛,再用自來水沖洗1h，莖剪成1.0cm、帶3個腋芽的莖段,在超凈工作臺上，用75%乙醇溶液中消毒30s，再用0.15%升汞浸泡20min，無菌水沖洗6次，接種至誘導培養基中進行不定芽誘,接種后置于每天光照14小時，光照強度為2000lx，置于培養溫度為28℃的條件下培養直至形成不定芽；

（2）繼代培養：將步驟（1）培養后長出的嫩芽從基部剪下并轉入增殖培養基上進行增殖培養，接種后先在28℃條件下全暗培養4天，然后置于每天光照8小時，光照強度為3200lx，置于培養溫度為28℃的條件下培養，每23天繼代一次；

（3）生根培養：將步驟（1）或（2）的芽苗長至2cm高時，切割成單芽并接種到生根培養基上進行誘導生根，接種后置于每天光照19小時，光照強度為3000lx，培養溫度為28℃的條件下培養至生根；

（4）煉苗移栽：將長至4cm的生根試管苗的培養瓶瓶蓋半打開在培養室中煉苗4天后，培養瓶瓶蓋全打開在室外于自然光照下煉苗5天后將試管苗從培養瓶中取出，洗掉根部培養基，盡量不傷害根部，栽入由泥炭土:黃泥土=1：1混合成的基質中并移栽定植于地塊，移栽30天內保持空氣濕度82%以上。

步驟（1）所述的誘導培養基為：MS+8.0mg/L 6-BA+4.5mg/L NAA+31g/L蔗糖+8.0g/L瓊脂，pH為5.8。

步驟（2）所述的增殖培養基為：MS+1.2mg/L NAA+6.0mg/L 6-BA+30g/L蔗糖+6.0g/L瓊脂，pH為5.8。

步驟（4）所述的生根培養基為：1/2MS+3.0mg/L IBA+2.2mg/L ABT₁+31g/L蔗糖+6.0g/L瓊脂，pH為5.7。

本發明的優點是：商陸以帶芽莖段為外植體，經過誘導培養、繼代培養、生根以及煉苗移栽等過程成功地獲得了商陸離體再生植株,建立了商陸的離體快速繁殖技術體系，對于商陸良種快繁和規模生產發展具有重要的現實意義，和具有明顯的經濟效益、社會效益。

具體實施方式

以下實施例是對本發明的進一步說明，不是對本發明的限制。

實施例1