[發明專利]一種制備單細胞固定針的裝置及方法

有效

• 申請號: 201710965562.3
• 申請日: 2017-10-17
• 公開（公告）號: CN107794210B
• 公開（公告）日: 2020-12-04
• 發明（設計）人: 汪夏燕;武園園;邵云龍;王亞楠;張奇;郭廣生
• 申請（專利權）人: 北京工業大學
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00;C03B23/09;C03B33/085
• 代理公司: 北京思海天達知識產權代理有限公司 11203
• 代理人: 張立改

1.一種制備單細胞固定針的方法，其特征在于，采用的裝置包括：一根用毛細管拉制器拉制的帶尖端的玻璃毛細管(1)、鎳鉻合金絲(2)、涂覆有不導電、耐高溫涂層的金屬螺紋桿(3)、石英片(4)、調壓器(5)、導線(6)、倒置顯微鏡(7)、三維調節臺(8)；在涂有涂層的金屬螺紋桿(3)的表面平行纏繞鎳鉻合金絲(2)，纏繞有鎳鉻合金絲(2)的金屬螺紋桿(3)固定在石英片(4)上，纏繞金屬螺紋桿的鎳鉻合金絲(2)的一端固定在石英片(4)上，另一端伸出石英片(4)的邊緣再折回到石英片(4)上，在石英片(4)邊緣的懸空處形成鎳鉻合金絲環尖頭；

鎳鉻合金絲(2)的兩端分別通過導線與調壓器(5)的輸出端連接；帶尖端的玻璃毛細管(1)固定到三維調節臺(8)上，調整帶尖端的玻璃毛細管(1)位于鎳鉻合金絲環尖頭附近，采用倒置顯微鏡(7)觀察制備過程；

采用上述裝置進行單細胞固定針的制備方法，包括以下步驟：

S1.購買普通玻璃毛細管，用毛細管拉制器將其拉斷，制作成帶尖端的玻璃毛細管(1)，備用；

S2.取一段金屬螺紋桿，用耐腐蝕、耐高溫、不導電的涂層涂覆金屬螺紋桿，使涂層將金屬螺紋桿全部覆蓋，放在85℃的加熱臺上，使涂層的溶劑全部揮發，并在85-120℃的溫度下繼續加熱2h-4h，使涂層完全固化在金屬螺紋桿上，制作成帶涂層的金屬螺紋桿(3)；

S3.取一段鎳鉻合金絲(2)，將其纏繞在帶涂層的金屬螺紋桿(3)上，將鎳鉻合金絲(2)在帶涂層的金屬螺紋桿(3)纏繞的起始和末了的位置用高溫涂層固定，兩端各留出一段鎳鉻合金絲；

S4.購買石英片(4)，將纏繞固定有鎳鉻合金絲(2)的帶涂層的金屬螺紋桿(3)固定于石英片(4)上，并將帶涂層的金屬螺紋桿(3)留有的鎳鉻合金絲(2)的一端在石英片(4)的一端邊緣伸出并折回固定，在石英片(4)邊緣的懸空處形成鎳鉻合金絲環尖頭伸出石英片；

S5.取兩根導線(6)，分別與固定于石英片(4)的鎳鉻合金絲(2)兩端相連；

S6.購買調壓器(5)一個，輸入端連接電源，輸出端與連接鎳鉻合金絲(2)的兩根導線(6)相連；

S7.將固定有鎳鉻合金絲(2)的石英片(4)放于倒置顯微鏡(7)載物臺上，在倒置顯微鏡下找到鎳鉻合金絲環尖頭的像；

S8.將帶尖端的玻璃毛細管(1)固定在三維調節臺(8)上，調整帶尖端的玻璃毛細管(1)尖端的位置，將帶尖端的玻璃毛細管(1)的尖端調到在倒置顯微鏡下能看到鎳鉻合金絲環尖頭的視野內，將帶尖端的玻璃毛細管(1)的尖端慢慢靠近鎳鉻合金絲環尖頭，留有一段距離；

S9.打斷:打開調壓器(5)，對鎳鉻合金絲(2)施加電壓，經過實驗找到鎳鉻合金絲環尖頭將帶尖端的玻璃毛細管(1)打斷的施加電壓范圍，將電壓調節到比該范圍較低的電壓進行預熱，帶尖端的玻璃毛細管(1)所要打斷的位置到鎳鉻合金絲環尖頭附近，并將帶尖端的玻璃毛細管(1)與鎳鉻合金絲環尖頭接觸，調整電壓到打斷電壓范圍內所需值，幾秒鐘后，確認鎳鉻合金絲環尖頭與帶尖端的玻璃毛細管(1)的表面相粘連，快速將帶尖端的玻璃毛細管(1)與鎳鉻合金絲環尖頭沿毛細管軸向方向分離，在倒置顯微鏡下將看到尖端被打斷的玻璃毛細管(A)；

S10.收口：將調壓器(5)的電壓值調大，此時在倒置顯微鏡(7)中可以看到鎳鉻合金絲(2)開始發出紅色的熱光，將調壓器(5)調至使尖端被打斷的玻璃毛細管(A)尖端端面熔化收口所需電壓范圍更低一些的位置，把尖端被打斷的玻璃毛細管(A)尖端端面靠近鎳鉻合金絲環尖頭附近正對的位置上，為避免電熱絲產生的熱量損害物鏡鏡頭，將鏡頭下調，而后經調壓器(5)調至端面熔化收口所需電壓，對端面進行熔化收口；

檢查尖端收口情況，先將調壓器(5)施加的電壓調小，再用物鏡靠近，檢查狀況，若收口還沒有達到預期結果，則重復該收口操作；

S11.尖端被打斷的玻璃毛細管(A)尖端端面熔化收口完成后，用鎳鉻合金絲環尖頭對尖端熔化收口的玻璃毛細管(B)前端進行彎折，在倒置顯微鏡(7)中同時看到鎳鉻合金絲環尖頭和尖端熔化收口的玻璃毛細管(B)前端，將調壓器(5)調節到彎折所需溫度的對應的電壓更低一些的電壓處，將尖端熔化收口的玻璃毛細管(B)前端需要彎折的位置，靠近鎳鉻合金絲環尖頭位置，將倒置顯微鏡(7)物鏡鏡頭下調節，把電壓調到彎折所需電壓處，將尖端熔化收口的玻璃毛細管(B)前端繼續靠近鎳鉻合金絲環尖頭，在倒置顯微鏡(7)下，觀察尖端熔化收口的玻璃毛細管(B)前端彎折的程度，隨時將調壓器(5)電壓調小，終止彎折，得到前端彎折后的玻璃毛細管(C)。