[發明專利]一種高效檢測甜味強度的工程化酵母生物系統及其應用

在審

• 申請號: 201710962610.3
• 申請日: 2017-10-17
• 公開（公告）號: CN107513505A
• 公開（公告）日: 2017-12-26
• 發明（設計）人: 李春;胡鵬晶;賈錦彤;任師超;陽洪宇;白嘉琪;倪江萍;姜恬;呂波
• 申請（專利權）人: 北京理工大學
• 主分類號: C12N1/19
• 分類號: C12N1/19;G01N21/64;C12R1/865
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種高效靈敏檢測物質甜味強度的工程化釀酒酵母生物系統及其應用，包括在釀酒酵母中表達哺乳動物源的G蛋白偶聯甜味受體T1R2/T1R3，結合宿主G蛋白偶聯信號通路傳導及調控上游信號，以啟動下游報告基因的表達作為信號輸出，并根據信號輸出強度來表征被測物質的甜味強度。

2.根據權利要求1所述的生物系統，其特征在于，將哺乳動物源的甜味受體T1R2/T1R3和G蛋白α亞基GPA1進行相應的修飾和密碼子優化，使之適配于上述生物系統，以解決上游信號傳導問題。

3.根據權利要求1所述的生物系統，其特征在于，敲除宿主自身對信號通路產生干擾的相關基因，包括sst2、ste2和far1。

4.根據權利要求1所述的生物系統，其特征在于，導入了報告基因表達盒以作為下游輸出信號的包括以P_fus為啟動子，報告基因(包括熒光蛋白和酶等報告基因)和終止子的誘導型檢測線路。

5.一種基于權利要求1所述生物系統的甜味強度檢測和標準制定方法。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，以下游檢測基因線路的信號輸出情況及其強度來表征被測物質是否有甜味及其甜味強度。

7.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，選擇一種有甜味的待測物質，分別測定待測物質在不同濃度時的甜味強度，選擇合適濃度為標準檢測濃度，再以標準檢測濃度分別測定多種待測物質的甜味強度，選擇合適單位，制作甜味強度標準，可根據不同待測物質的性質制定相應標準。