[發明專利]一種腫瘤靶向性多肽

有效

• 申請號: 201710960927.3
• 申請日: 2017-10-17
• 公開（公告）號: CN107540739B
• 公開（公告）日: 2020-09-01
• 發明（設計）人: 勞興珍;鄭珩;吳揚生
• 申請（專利權）人: 中國藥科大學
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C12N15/12;A61K47/64;A61K47/65;A61K38/17;A61P35/00;A61P35/04
• 代理公司: 南京艾普利德知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32297
• 代理人: 張鉑

本發明公開了一種腫瘤靶向性多肽(p46?3)，肽46(人細胞腫瘤抗原p53的361～382片段)的羧基端通過連接肽與腫瘤靶向性多肽片段精氨酸—甘氨酸—天冬氨酸連接。本發明通過大腸桿菌誘導表達，經過金屬鰲合親和層析和凝膠層析制備得到p46?3。體外實驗表明p46?3具有比肽46更顯著的抗腫瘤細胞生長的作用。

技術領域

本發明涉及生物工程制藥技術領域，具體涉及一種腫瘤靶向性多肽。

背景技術

研究表明，p53基因具有阻滯細胞周期、維持基因組穩定、促進細胞凋亡和抑制腫瘤血管生成等作用(李文娟，潘慶杰，李美玉.p53基因及其功能研究進展.生物技術通訊，2014,25(2):282-285.)。肽46，人細胞腫瘤抗原p53的361～382片段，氨基酸序列GSRAHSSHLK SKKGQSTSRHKK(SEQ ID No：3),是一種富含賴氨酸的22肽，相應于p53的單股DNA末端結合位點。在體外它能活化野生型p53的特異性DNA結合作用，并誘導表達p53的腫瘤細胞凋亡(G.Selivanova et al.Nature Med.1997,3,632)。

整合素α_vβ₃在腫瘤細胞的黏附、轉移和腫瘤血管新生中發揮了重要作用(Pasqualini R,Arap W,McDonald DM.Probing the structural and moleculardiversit y of tumor vasculature[J].Trends Mol Med,2002,8(12):563-571)。在一些腫瘤細胞或者腫瘤新生血管內皮細胞整合素α_vβ₃受體常特異性地高表達,而在正常組織血管中不表達或表達量很少(Zetter BR.On target with tumor blood vessel markers[J].Nat Biot echnol,1997,15(12):1243-1244)，RGD肽與腫瘤血管內皮細胞上的整合素結合,阻止或延緩腫瘤遷移和腫瘤血管生成。整合素α_vβ₃受體由于可與RGD肽結合、介導多種病理生理過程而成為整合素家族中占重要地位。RGD肽是一類含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp)的小分子多肽，廣泛存在于生物體內各種組織的細胞外基質以及血液的多種成分中,人體中最常見的含RGD序列的蛋白，包括纖維蛋白、層粘連蛋白、纖連蛋白、膠原等(Temming K,Schiffelers RM,Molema G,et al.Kok RJ.RGD-based strategies forselective delivery of therapeutics and imaging agents to the tumourvasculature[J].Drug Resist Updat,2005,8(6):381-402.)。含RGD序列蛋白與受體整合素結合，參與細胞與細胞、細胞與基質間的相互作用，激活多條信號傳導通路,在多種生理和病理過程中發揮重要作用。含RGD序列的多肽可與腫瘤細胞表面的α_vβ₃特異性結合,在腫瘤細胞的黏附、轉移和腫瘤新生血管生成中發揮重要作用。

發明內容

本發明利用的Arg-Gly-Asp序列具有腫瘤靶向的優勢，將肽46(p46)和RGD肽在C端進行連接，構建一個具有與αν類整合素的特異結合的特性的新型抗腫瘤藥物，具有腫瘤細胞靶向性。

本發明具體技術方案如下：

一種腫瘤靶向性多肽，肽46的羧基端通過連接肽與含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列的多肽(RGD肽)連接。現有技術下，含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)基序的線性多肽、環狀多肽都在本發明所述的RGD肽的范疇。本發明的一個優選的方案，RGD肽的序列如SEQ ID NO:1所示。

本發明所述的連接肽為1～50個富含Gly和/或Ala和/或Ser氨基酸殘基的柔性肽。優選的，所述連接肽氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。