[發(fā)明專利]一種肉葡萄球菌合成培養(yǎng)基及其發(fā)酵液的制備方法與應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710958673.1
• 申請(qǐng)日: 2017-10-16
• 公開（公告）號(hào): CN107502620B
• 公開（公告）日: 2021-07-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 高強(qiáng);唐巧巧;張變強(qiáng);朱燕
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天津科技大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N15/74
• 分類號(hào): C12N15/74;C12N15/62;C12N15/66;C12N1/20;C12R1/44
• 代理公司: 天津市杰盈專利代理有限公司 12207
• 代理人: 朱紅星

1.一種肉葡萄球菌合成培養(yǎng)基，其特征在于，按1L體積計(jì)算，是由如下重量的原料組成：

無(wú)水葡萄糖40g，賴氨酸0.4~1.0g，纈氨酸0.4~3.0g，甘氨酸0.4~4.0g，精氨酸2.0g，脯氨酸2.0g，谷氨酸0.4~7.0g，胱氨酸0.4~3.0g，色氨酸0.4~3.0g，鹽酸硫胺素2.0mg，泛酸鈣2.0mg，煙酸2.0mg，硫酸錳2.0mg，磷酸二氫鉀0.5g，七水硫酸鎂0.4g，七水硫酸亞鐵0.008g，三水磷酸氫二鉀3.0g，3-(N-嗎啉)丙磺酸8g，剩余為水。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肉葡萄球菌合成培養(yǎng)基，其特征在于：所述肉葡萄球菌合成培養(yǎng)基的pH=6.5~8.0。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的肉葡萄球菌合成培養(yǎng)基，其特征在于：

無(wú)水葡萄糖40g，賴氨酸1.0g，纈氨酸3.0g，甘氨酸1.0g，精氨酸2.0g，脯氨酸2.0g，谷氨酸7.0g，色氨酸0.4g，胱氨酸1.0g，泛酸鈣2mg，煙酸2mg，鹽酸硫胺素2mg，硫酸錳2mg，磷酸二氫鉀0.5g，七水硫酸鎂0.4g，七水硫酸亞鐵0.008g，三水磷酸氫二鉀3g，3-(N-嗎啉)丙磺酸8g。

4.利用權(quán)利要求1所述合成培養(yǎng)基制備肉葡萄球菌發(fā)酵液的方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1、種子培養(yǎng)：

種子培養(yǎng)基配方為：胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、氯化鈉10g/L；pH=7.5；將肉葡萄球菌單菌落接種到裝有50mL的種子培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，在37℃搖床中以180rpm恒溫連續(xù)培養(yǎng)12h，再按照1%接種量將菌液接種到裝有50mL的種子培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，在37℃搖床中以180rpm恒溫連續(xù)培養(yǎng)8h，獲得肉葡萄球菌液體種子液；所述肉葡萄球菌含有綠色熒光蛋白；

S2、配制肉葡萄球菌合成培養(yǎng)基：

合成培養(yǎng)基配方為：無(wú)水葡萄糖40g，賴氨酸0.4~1.0g，纈氨酸0.4~3.0g，甘氨酸0.4~4.0g，精氨酸2.0g，脯氨酸2.0g，谷氨酸0.4~7.0g，胱氨酸0.4~3.0g，色氨酸0.4~3.0g，鹽酸硫胺素2.0mg，泛酸鈣2.0mg，煙酸2.0mg，硫酸錳2.0mg，磷酸二氫鉀0.5g，七水硫酸鎂0.4g，七水硫酸亞鐵0.008g，三水磷酸氫二鉀3.0g，3-(N-嗎啉)丙磺酸8g；

S3、液體發(fā)酵培養(yǎng)：

按0.5%~1.5%接種量將液體種子轉(zhuǎn)接于所述合成培養(yǎng)基中，在30~38℃下150~200rpm搖床中連續(xù)培養(yǎng)10-12 h，即可獲得含有綠色熒光蛋白的肉葡萄球菌發(fā)酵液。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備肉葡萄球菌發(fā)酵液的方法，其特征在于：

步驟S1中，種子培養(yǎng)基配方為：胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L、氯化鈉10g/L，pH=7.5；單菌落接種于37℃下180rpm搖床中培養(yǎng)12h。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備肉葡萄球菌發(fā)酵液的方法，其特征在于：

步驟S3中，按1%接種量將液體種子轉(zhuǎn)接于所述合成培養(yǎng)基中，在37℃、180rpm搖床中連續(xù)培養(yǎng)12h。