[發明專利]提高蟲草菌素含量的蛹蟲草?杜仲液體發酵方法及應用

在審

• 申請號: 201710953940.6
• 申請日: 2017-10-13
• 公開（公告）號: CN107586811A
• 公開（公告）日: 2018-01-16
• 發明（設計）人: 梁建東;田維毅;王平;陳萬浩;徐麗麗;柴宇航;張鑫;楊長福;蔡琨;曹峰;王文佳;俞琦;段學清;孫成龍;陳瑞;李玉平
• 申請（專利權）人: 貴陽中醫學院
• 主分類號: C12P19/40
• 分類號: C12P19/40;A23L33/00;A61K36/46;A61P9/12;A61P3/10;A61P3/06;A61P37/04;A61P19/08;A61P39/00;C12R1/645;A61K31/7076
• 代理公司: 貴陽春秋知識產權代理事務所(普通合伙)52109
• 代理人: 李萬強

技術領域

本發明涉及一種以杜仲為主要底物成分之一的蛹蟲草發酵轉化產物的獲取及應用以及提高發酵產物中蟲草菌素含量的方法，尤其是一種提高蟲草菌素含量的蛹蟲草-杜仲液體發酵方法及應用，屬于微生物發酵技術和生物轉化技術領域。

背景技術

在繼承傳統中藥發酵法的基礎上，結合現代微生物發酵工程技術對中藥開發利用，成為保健品、功能食品和新藥研發中的一條重要途徑。生物轉化法具有立體選擇性和位置選擇性、反應條件溫和、催化效率高、反應多樣性、副產物少、不污染環境、后處理簡單等優點而得到廣泛應用。真菌轉化中藥不需要其他的催化劑，只要先培養大量所需真菌菌種，然后對底物進行單元化學合成反應，所以生物轉化法比化學試劑反應法更專一、更有效。真菌轉化中藥一般都在常溫和自然pH條件下進行催化反應，運行操作簡單安全，產生的公害少，后處理也很簡單。轉化結果包括提高中藥藥效、增加中藥有效成分和真菌活性產物的含量、減弱中藥毒副作用等。

杜仲Eucommia ulmoides Oliv，又名思仙、思仲、木棉、絲連等，是我國傳統的名貴滋補藥材，是衛生部公布的可以用于保健品的中藥，有“活化石植物”之稱。《神農本草經》和《本草綱目》均將杜仲列為上品，并謂其“主治腰膝痛，補中，益精氣，堅筋骨，除陰下癢濕，小便余瀝。久服，輕身耐老”；“凡下焦之慮，非杜仲不補；下焦之濕，非杜仲不利；足脛之酸，非杜仲不去；腰膝之痛，非杜仲不除”。杜仲具有降壓、降血脂血糖、抗腫瘤、抗菌抗病毒、抗炎、抗氧化、保肝利膽、補腎利尿、抗骨質疏松、安胎、抗衰老、提高膠原蛋白合成等藥理作用，可用于腰膝酸痛、筋骨痿弱、陽痿、尿頻、胎漏欲墜、陰下濕癢等癥。杜仲中含有多種有效成分，其中木脂素類為主要成分之一，其中松脂醇二葡萄糖苷(PDG) 被證明是杜仲降血壓的主要成分。

蛹蟲草Cordyceps militaris (L.)Link是衛生部批準的新資源食品，也是我國名貴中藥材之一。據《新華本草綱目》記載：“蛹蟲草味甘，性平，有益肝腎，補精髓，止血化瘀功能。”多年來的藥理實驗及臨床實踐證明，蛹蟲草具有調節免疫、抗腫瘤、抗病毒、抗感染、抗氧化、抗疲勞、抗衰老、降血糖、降血脂、保護肝腎功能等多種藥理活性。其主要成分蟲草菌素具有免疫調節、降糖降脂等作用。

因此，利用蛹蟲草液體發酵轉化杜仲，提高發酵產物中蟲草菌素含量、提供具有增強免疫，降三高、強筋骨、增強體質等功效的發酵產物及其制備方法具有較好經濟和社會價值。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于提供一種提高蟲草菌素含量的蛹蟲草-杜仲液體發酵方法，得到具有增強免疫，降三高、強筋骨、增強體質等功效的發酵產物，產生較好的經濟和社會價值。本發明的另一個目的在于提供上述發酵產物的應用。

為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案如下：

一種提高蟲草菌素含量的蛹蟲草-杜仲液體發酵方法，該方法包括以下步驟：

（1）菌種活化：將保藏的蛹蟲草菌種接種到PDA培養基平板上，接種后放入25℃培養箱黑暗培養4-5d，待菌種長滿平板2/3范圍，取出，備用；

（2）液體基礎培養基：取1000ml水、200g去皮土豆、20g葡萄糖，土豆高溫沸煮30min，用紗布過濾并補足水分至1000ml，加熱，加入葡萄糖攪拌至其溶解，倒入500ml錐形瓶中，每瓶100ml，滅菌鍋121℃高溫滅菌30min；

（3）液體發酵培養基制備：在上述步驟（2）液體基礎培養基的基礎上，加入杜仲粉，杜仲粉的加入量為3g/100ml發酵液，滅菌鍋121℃高溫滅菌30min，取出放冷，備用；

液體發酵的條件控制及產物處理：將活化后的蛹蟲草菌種接種到液體發酵培養基中，放入25℃搖床，以200R/min速率黑暗發酵144h，得到蛹蟲草-杜仲液體發酵產物。

一種蛹蟲草-杜仲液體發酵產物，根據上述方法得到，該發酵產物含有蟲草菌素2.14 mg/100ml，含杜仲有效成分PDG為23.26 mg/100ml。

上述蛹蟲草-杜仲液體發酵產物可以應用于制備增強免疫，降三高、強筋骨、增強體質的保健食品或藥物。

本發明的有益效果：與現有技術相比，本發明將杜仲與蛹蟲草共培養，并獲取培養物，操作簡便，效果良好，大大提高了發酵產物中蟲草菌素的含量，提供了具有增強免疫，降三高、強筋骨、增強體質等功效以及具有開發保健食品和藥品潛力的的發酵產物，具有較好的經濟和社會價值。

下面結合具體實施方式對本發明作進一步的說明。

具體實施方式