[發(fā)明專利]一種砷離子的檢測(cè)方法及檢測(cè)試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710951750.0
• 申請(qǐng)日: 2017-10-13
• 公開（公告）號(hào): CN107884565B
• 公開（公告）日: 2019-12-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳俊華;潘蘇紅;周丹華;潘家峰;王琦
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣東省生態(tài)環(huán)境技術(shù)研究所
• 主分類號(hào): G01N33/53
• 分類號(hào): G01N33/53
• 代理公司: 44205 廣州嘉權(quán)專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司
• 代理人: 許飛

1.一種砷離子的檢測(cè)試劑盒，其特征在于：包括緩沖液、DNA莖環(huán)結(jié)構(gòu)H1、DNA莖環(huán)結(jié)構(gòu)H2、核酸DNA1和核酸內(nèi)切酶；其中：

DNA莖環(huán)結(jié)構(gòu)H1依次具有d區(qū)域、c區(qū)域、a區(qū)域和b區(qū)域；其中a區(qū)域的部分堿基與d區(qū)域的全部堿基互補(bǔ)配對(duì)，a區(qū)域的剩余堿基與c區(qū)域的部分堿基互補(bǔ)，共同形成莖環(huán)的莖部分，c區(qū)域的其余堿基形成莖環(huán)的環(huán)部分，b區(qū)域位于莖環(huán)結(jié)構(gòu)外側(cè)；c區(qū)域是As³⁺的核酸適體，能與As³⁺特異性結(jié)合，從而打開莖環(huán)結(jié)構(gòu)H1；

DNA莖環(huán)結(jié)構(gòu)H2依次具有f區(qū)域、b*區(qū)域、e*區(qū)域和f*區(qū)域；其中f區(qū)域與f*區(qū)域互補(bǔ)配對(duì)，形成莖環(huán)的莖部分；b*區(qū)域、e*區(qū)域形成莖環(huán)的環(huán)部分；b*區(qū)域含有核酸內(nèi)切酶識(shí)別的酶切位點(diǎn)序列；H2兩端分別修飾熒光基團(tuán)與淬滅基團(tuán)；

核酸DNA1包含a*區(qū)域和e區(qū)域；

其中，a、b、e、f區(qū)域分別依次與a*、b*、e*、f*區(qū)域序列互補(bǔ)配對(duì)；

H1的序列為5’-TGAGTG-GGTAATACGACTCACTATAGGGAGATACCAGCTTATTCAATTTTACAGAACAACCAACGTCGCTCCGGGTACTTCTTCATCGAGATAGTAAGTGCAATCT-ATTACCCACTCA-GCTGAGG-3’；

H2的序列為5’-ACTAGCA-CCTCAGC-ATCCGAA-TGCTAGT-3’；

DNA1的序列為5’-TTCGGAT-TGAGTGGGTAAT-3’；

核酸內(nèi)切酶為Nt.BbvCI。

2.一種砷離子檢測(cè)方法，其特征在于，包括下列步驟：

1)用緩沖液分別溶解H1、DNA1和H2，將待測(cè)溶液與H1溶液混勻，充分反應(yīng)；

2)加入DNA1，充分反應(yīng)；

3)加入H2，充分反應(yīng)；

4)加入核酸內(nèi)切酶Nt.BbvCI，充分反應(yīng)；

5)檢測(cè)反應(yīng)液的熒光強(qiáng)度來確定結(jié)果；

其中緩沖液、DNA莖環(huán)結(jié)構(gòu)H1、DNA莖環(huán)結(jié)構(gòu)H2、核酸DNA1和核酸內(nèi)切酶如權(quán)利要求1所述。