[發明專利]一種豬流行性腹瀉病毒弱毒株、其培養方法及應用

有效

• 申請號: 201710948069.0
• 申請日: 2017-10-12
• 公開（公告）號: CN107619822B
• 公開（公告）日: 2021-06-04
• 發明（設計）人: 劉惠莉;陶潔;李本強;程靖華;石迎
• 申請（專利權）人: 上海市農業科學院
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;A61K39/215;A61P31/14
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 楊昀

1.一種豬流行性腹瀉病毒弱毒株，名稱為豬流行性腹瀉病毒JS/PEDV/2/2014G100，保藏編號CCTCC NO.V201728，該弱毒株的輔助基因ORF3比PEDV強毒株的ORF3缺失49個核苷酸，其核苷酸序列與如SEQ ID NO.1所示序列有至少99.8％的同源性，且其在Vero細胞上的增殖不依賴于胰酶。

2.根據權利要求1所述豬流行性腹瀉病毒弱毒株，其特征在于，其S基因氨基酸序列與如SEQ ID NO.2所示序列有至少98.1％的同源性。

3.一種豬流行性腹瀉病毒弱毒株的培養方法，包括如下步驟：

將0.5-1MOI如權利要求1或2所述的豬流行性腹瀉病毒弱毒株JS/PEDV/2/2014G100接種于Vero細胞，吸附1-2h后，棄去細胞上清，加入含有1-3％FBS的DMEM培養液，培養60-72h，收集細胞培養液，獲得所述豬流行性腹瀉病毒弱毒株。

4.根據權利要求3所述豬流行性腹瀉病毒弱毒株的培養方法，其特征在于，將收集的細胞培養液保存于-40℃以下，備用。

5.一種豬流行性腹瀉弱毒候選疫苗，其包含權利要求1或2所述的豬流行性腹瀉病毒弱毒株。