[發明專利]一種鑒定鰻鱺種質的引物、試劑盒和方法

在審

• 申請號: 201710935173.6
• 申請日: 2017-10-10
• 公開（公告）號: CN107488736A
• 公開（公告）日: 2017-12-19
• 發明（設計）人: 賴曉健;江興龍;羅碧蓮
• 申請（專利權）人: 集美大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 福州市景弘專利代理事務所(普通合伙)35219
• 代理人: 林祥翔,徐劍兵

1.一種鑒定鰻鱺種質的引物，其特征在于，包括以下4對引物中的一種或多種，所述4對引物序列為：

aj S1:TTATGGCTGATTCATCCGAAATT、aj A1 CCTGCTAATGGGTTGAGTACTAAA；

r-a S1 TGATGCTGACTTTGCCACTGAT；r-a A2 GTTCGTTCCCTTGAAAACCTTGT；

bp-m S5 TCCATACTTCTCATACAAAGACCTAT、bp-m A3 CTAGTCAACCTACTAATGGGTTTAAT；

m-a S4 CCGCCGTCCCATACGTAGGAG、m-a A4 TATTTTGTTTTCTAGTCAACCTACTAAT。

2.一種鑒定鰻鱺種質的試劑盒，其特征在于，包括權利要求1所述的引物。

3.一種鑒定鰻鱺種質的方法，其特征在于，包括如下步驟：

提取日本鰻鱺、美洲鰻鱺、花鰻鱺、太平洋雙色鰻鱺、歐洲鰻鱺中任一苗種或烤鰻產品的基因組DNA；

用如權利要求1所述的引物對鰻鱺DNA樣品進行PCR擴增；

根據瓊脂糖凝膠電泳檢測條帶的大小或陰性陽性結果判斷鰻鱺種質。

4.如權利要求3所述的鑒定鰻鱺種質的方法，其特征在于，所述步驟“對鰻鱺DNA樣品進行PCR擴增”中的PCR反應條件具體包括：

94℃預變性5分鐘；

27個循環的94℃變性45秒、58℃退火45秒、72℃延伸45秒過程；

72℃延伸5分鐘。

5.如權利要求3或4所述的鑒定鰻鱺種質的方法，其特征在于，所述“根據瓊脂糖凝膠電泳檢測條帶的大小或陰性陽性結果判斷鰻鱺種質”具體包括：

引物對ajS1/ajA1的PCR結果為陽性者，判斷為日本鰻鱺；

引物對r-aS1/r-aA2的PCR結果為陽性者，判斷為美洲鰻鱺；

引物對bp-mS5/bp-mA3和m-aS4/m-aA4的PCR結果為陽性者，判斷為太平洋雙色鰻鱺；

引物對m-aS4/m-aA4的PCR結果為陽性者，判斷為花鰻鱺；

引物對ajS1/ajA1、r-aS1/r-aA2、bp-mS5/bp-mA3和m-aS4/m-aA4的PCR結果均為陰性者，判斷為歐洲鰻鱺。