[發明專利]一種重組大腸桿菌全細胞轉化生產氨基葡萄糖的方法在審
| 申請號： | 201710934345.8 | 申請日： | 2017-10-10 |
| 公開（公告）號： | CN108070604A | 公開（公告）日： | 2018-05-25 |
| 發明（設計）人： | 劉龍;姜竹;陳堅;堵國成;李江華 | 申請（專利權）人： | 江南大學 |
| 主分類號： | C12N15/55 | 分類號： | C12N15/55;C12N9/80;C12N1/21;C12N15/70;C12P19/26;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211 | 代理人： | 張勇 |
| 地址： | 214122 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 氨基葡萄糖 乙酰氨基葡萄糖 重組大腸桿菌 全細胞 底物 生產 低生產成本 基因工程菌 全細胞催化 發酵工程 工藝步驟 生產操作 生產條件 脫乙酰酶 異源表達 轉化體系 重組菌 二糖 構建 轉化 基因 安全 | ||
1.一種生物法生產氨基葡萄糖的方法，其特征在于，以幾丁二糖脫乙酰酶或產幾丁二糖脫乙酰酶的細胞為催化劑，轉化N-乙酰氨基葡萄糖生產氨基葡萄糖；所述幾丁二糖脫乙酰酶含有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述產幾丁二糖脫乙酰酶的細胞為表達SEQ ID NO.1所示幾丁二糖脫乙酰酶的重組大腸桿菌。
3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述全細胞轉化是以50～200mmol/L的N-乙酰氨基葡萄糖為底物，在30-90℃，pH 5.0-11.0的條件下，轉化0.5-20h。
4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述全細胞轉化是在細胞終濃度為10.6～47.9g/L的反應體系中轉化。
5.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述全細胞轉化是在pH 7.0-10.0，4-45℃的條件下轉化4-20h。
6.一種重組大腸桿菌，其特征在于，所述大腸桿菌產幾丁二糖脫乙酰酶；所述幾丁二糖脫乙酰酶的含有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。
7.根據權利要求6所述的重組大腸桿菌，其特征在于，以E.coli BL21(DE3)為宿主，以pET-28a(+)為表達載體。
8.一種構建權利要求7所述重組大腸桿菌的方法，其特征在于，將SEQ ID NO.2所示基因與載體連接，在大腸桿菌中表達。
9.權利要求1-5任一所述的方法在制備含有氨基葡萄糖的產品中的應用。
10.權利要求6或7所述的重組大腸桿菌在食品領域的應用。
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