[發明專利]重組膠原蛋白及其溫敏水凝膠

有效

• 申請號: 201710933005.3
• 申請日: 2017-10-10
• 公開（公告）號: CN107540744B
• 公開（公告）日: 2021-05-14
• 發明（設計）人: 楊樹林;康肸;鄧愛鵬
• 申請（專利權）人: 南京艾瀾德生物科技有限公司
• 主分類號: C07K14/78
• 分類號: C07K14/78;C12N15/12;C12P21/02;C08J9/40;C08J9/28;C08J3/075;A61L27/20;A61L27/24;A61L27/52
• 代理公司: 北京鼎佳達知識產權代理事務所(普通合伙) 11348
• 代理人: 候蔚寰

1.溫敏水凝膠，其由如下方法制備：

(1)將殼聚糖溶解于酸性溶液中，透析后冷凍干燥，獲得冷凍干燥產物；

(2)將冷凍干燥產物與氨基酸序列如序列表中的SEQ ID NO：1所示的重組膠原蛋白混合溶解于水中，得到水溶液；

(3)向水溶液中加入碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺反應，透析后冷凍干燥，獲得反應產物；和，

(4)反應產物加水溶解后加入含β-甘油磷酸鈉和碳酸氫鈉的溶液，于37℃靜置。

2.權利要求1所述的溫敏水凝膠，其中在步驟(1)中，

酸性溶液是乙酸水溶液；

殼聚糖溶解于酸性溶液中所得溶液的殼聚糖含量為2-4％(w/w)；或，

透析時間為3-7天。

3.權利要求1所述的溫敏水凝膠，其中在步驟(1)中，酸性溶液是乙酸水溶液，其中乙酸含量為0.05-0.2M。

4.權利要求1所述的溫敏水凝膠，其中在步驟(2)中，

水溶液中殼聚糖含量為1-2％(w/w)；

水溶液中重組膠原蛋白含量為2-4％(w/w)；或，

水是去離子水。

5.權利要求1所述的溫敏水凝膠，其中在步驟(3)中，

碳二亞胺的終濃度為5-30μM；

N-羥基琥珀酰亞胺的終濃度為15-90μM；

碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺的摩爾比為1:3；

反應的時間為1-6小時；

反應的溫度為室溫；或，

透析時間為3-7天。

6.權利要求1所述的溫敏水凝膠，其中在步驟(4)中，

反應產物加水溶解后濃度為2～5％(W/W)；

反應產物、β-甘油磷酸鈉和碳酸氫鈉的重量比例為20～40：50～150：3～11； 或，靜置的時間為2～10分鐘。

7.權利要求1所述的溫敏水凝膠，其中在步驟(4)中，反應產物加水溶解后濃度為2～4％(W/W)。

8.溫敏水凝膠的制備方法，其由如下步驟組成：

(1)將殼聚糖溶解于酸性溶液中，透析后冷凍干燥，獲得冷凍干燥產物；

(2)將冷凍干燥產物與氨基酸序列如序列表中的SEQ ID NO：1所示的重組膠原蛋白混合溶解于水中，得到水溶液；

(3)向水溶液中加入碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺反應，透析后冷凍干燥，獲得反應產物；和，

(4)反應產物加水溶解后加入含β-甘油磷酸鈉和碳酸氫鈉的溶液，于37℃靜置。

9.權利要求8所述的方法，其中在步驟(1)中，

酸性溶液是乙酸水溶液；

殼聚糖溶解于酸性溶液中所得溶液的殼聚糖含量為2-4％(w/w)；或，

透析時間為3-7天。

10.權利要求8所述的方法，其中在步驟(1)中，酸性溶液是乙酸水溶液，其中乙酸含量為0.05-0.2M。

11.權利要求8所述的方法，其中在步驟(2)中，

水溶液中殼聚糖含量為1-2％(w/w)；

水溶液中重組膠原蛋白含量為2-4％(w/w)；或，

水是去離子水。

12.權利要求8所述的方法，其中在步驟(3)中，

碳二亞胺的終濃度為5-30μM；

N-羥基琥珀酰亞胺的終濃度為15-90μM；

碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺的摩爾比為1:3；

反應的時間為1-6小時；

反應的溫度為室溫；或，

透析時間為3-7天。