[發明專利]一種側向流層析檢測反應啟動控制方法

有效

• 申請號: 201710932403.3
• 申請日: 2017-10-10
• 公開（公告）號: CN107727850B
• 公開（公告）日: 2021-08-27
• 發明（設計）人: 劉鳳鳴
• 申請（專利權）人: 常州博聞迪醫藥股份有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/53
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• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種側向流層析檢測反應啟動控制方法，所述方法特征在于將加載液相的側向流層析檢測結構置于離心裝置上，通過離心驅動液相進入固相檢測膜并維持流動，進而啟動側向流層析檢測反應，可用于膠體金屬免疫層析檢測方法、熒光免疫層析檢測方法和化學發光免疫層析檢測方法。本發明具有準確性高、重復性好、使用便捷、穩定性高、便于儲存的特點。

技術領域

本發明涉及一種側向流層析檢測反應啟動控制方法，屬于免疫檢測技術領域。

背景技術

免疫學檢測技術是應用免疫學原理設計的測定抗原、抗體、免疫細胞及化學成分等的實驗手段，廣泛用于來源于人體和動物體可進行疾病診斷和健康檢測的樣品以及用于環境、藥物分析、食品和工業分析的樣品。常用的有免疫濁度技術、固相酶免疫測定技術、化學發光檢測技術、免疫熒光標記技術、流式細胞術、膠體金技術等。免疫濁度技術，也稱免疫濁度法是可溶性抗原、抗體在液相中特異結合，產生一定大小的復合物，形成光的折射或吸收，測定這種折射或吸收后的透射光或散射光作為計算單位，用于定量檢測，但檢測靈敏度低，不適合于微量檢測。固相酶免疫測定技術基于抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記，結合在固相載體表面的抗原或抗體保持其免疫學活性，抗原或抗體的酶結合物既保留其免疫學活性，又保留酶的活性，在測定時，把受檢標本（測定其中的抗體或抗原）和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應，具有靈敏度高、線性響應范圍寬和易于實現自動化等顯著優點，但檢測反應時間長限制了其使用。免疫化學發光檢測技術是一種高靈敏的微量及痕量分析技術，具有操作方便、靈敏度高、線性響應范圍寬和易于實現自動化等顯著優點，廣泛地應用于環境、臨床、藥物分析、食品和工業分析中，也是基于抗原或抗體的固相分離手段及抗原或抗體的發光試劑標記技術，但檢測反應時間長、檢測試劑需要冷藏保存和運輸及對檢測設備的要求高影響其使用。免疫熒光標記技術、流式細胞術、膠體金技術也是常用的檢測技術被廣泛使用，但均有其相應的不足，檢測反應時間長或靈敏度、準確性和穩定性欠缺是普遍存在的不足。高靈敏度、快速、便捷、小型化、全定量、自動化是目前臨床免疫檢測技術產品的發展趨勢，但現有的都無法同時實現上述功能。側向流層析檢測的自動化控制是實現上述檢測功能的重要環節，而如何人為控制反應啟動是實現側向流層析檢測自動化的關鍵技術。側向流檢測的現有技術在加載液體后檢測反應就會立即啟動，無法實現通過人為控制啟動，這樣嚴重限制了批量檢測反應的自動化，因此，開發反應啟動控制技術和方法具有重要意義。

發明內容

本發明的目的是提供一種側向流層析檢測反應啟動控制方法，所述方法特征在于將加載液相的側向流層析檢測結構置于離心裝置上，通過離心驅動液相進入固相檢測膜并維持流動，進而啟動側向流層析檢測反應，具有如下特征：1）所述側向流層析檢測結構由包括液相承載結構、固相檢測膜、支撐底片組成，其中液相承載結構和固相檢測膜依次置于支撐底片上；2）所述液相承載結構與所述固相檢測膜之間留有阻礙液相自然流動的間隙；3）使用時將側向流層析檢測結構置于離心裝置上；4）所述液相位于液相承載結構內，且位于所述固相檢測膜的近心側；5）所述液相由所述離心裝置離心驅動流經所述間隙，進入所述固相檢測膜并維持流動。

上述的方法中，所述側向流層析檢測包括以膠體金屬為指示劑的膠體金屬免疫層析、以熒光素為指示劑的熒光免疫層析和化學發光物質和/或化學發光酶介導發光作為指示劑的化學發光免疫層析的至少一種。

上述的方法中，所述間隙為空氣、過濾膜墊的至少一種。

上述的方法中，所述間隙寬度選擇0.5-3mm，過濾膜墊的孔徑選擇0.1-5微米。所述間隙寬度優選0.5-2mm，所述間隙寬度更優選0.5-1mm。過濾膜墊的孔徑優選0.1-3微米，過濾膜墊的孔徑更優選0.1-1微米。

上述的方法中，所述離心驅動的離心裝置轉速選擇50-500轉/分鐘，優選100-400轉/分鐘，更優選100-300轉/分鐘。