[發明專利]碘離子信號增強的雙氧水比色檢測方法

有效

• 申請號: 201710925314.6
• 申請日: 2017-10-03
• 公開（公告）號: CN107764763B
• 公開（公告）日: 2020-07-24
• 發明（設計）人: 胡蓉;張茜;李德蕾;張坤蕾;白茹燕;鄧燕;馬玉蟬;楊云慧
• 申請（專利權）人: 云南師范大學
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33;G01N21/78
• 代理公司: 昆明科陽知識產權代理事務所 53111
• 代理人: 李行健

碘離子信號增強的雙氧水比色檢測方法，屬于紫外比色可見檢測技術領域。合成Pt/COF?LZUl、Cu(Ⅱ)?HKUST?1、Pt/Ru/C納米材料中的至少一種，將其中一種加入蒸餾水，超聲分散得分散液，將分散液加入到TMB中，加入待測濃度的雙氧水，加入Tris緩沖溶液，加入KI水溶液，在650nm處用紫外分光光度計測其吸光度值。由于不依賴于過氧化物酶等蛋白酶的催化活性，穩定性高，不會因高濃度的鹽離子發生團聚而產生假陽(陰)性信號。在溫和條件下，納米框架材料能增強碘離子的催化活性，能催化溶解氧氧化顯色底物TMB，這表明碘離子能夠信號放大，可提高體系的靈敏度，方便成本低穩定性好。

技術領域

本發明屬于紫外比色可見檢測技術領域，具體為一種可視化檢測生物分子的方法。

背景技術

生物體內存在各種各樣的生物分子，如蛋白質、氨基酸以及小分子代謝物等，它們有著特殊的生理功能，并在生命活動中發揮著至關重要的作用。因此，準確實時監控體內這些生物分子的濃度變化和分布情況，對于研究生物體的各種生理和病理變化、以及進行疾病的早期診斷等都很重要。比色法(colorimetry)是通過比較或測量有色物質溶液的顏色深度來確定待測組分含量的方法。比色法顯色穩定、重現性好、可視化、操作簡便、價格低廉。目前，常見的比色法大致可分為：金屬納米粒子介導的可視化策略、刻蝕金銀納米粒子的可視化策略和基于過氧化物酶催化活動的可視化策略。其中基于過氧化物酶催化活動的可視化策略包括酶聯免疫法(ELISA)、脫氧核酶(DNAzyme)法、納米模擬酶法等。雖然上述方法應用廣泛，但存在以下難題：

(1)金屬納米比色檢測法采用金屬納米顆粒為信號探針，識別分子修飾的納米金顆粒的聚集而導致的表面等離子體共振特性的顏色變化，然而在高濃度鹽離子情況下，納米金顆粒易團聚而產生假陽或陰性信號。

(2)在ELISA中，其底物一般為無色化合物，經蛋白酶作用后成為有色的產物，通常是過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶來催化底物轉化成有色的產物，從而進行定量分析。在一些苛刻的條件，例如當高溫或重金屬離子(如汞)存在時，蛋白質酶的活性會發生不可逆的變性，從而限制了ELISA在實際中的廣泛應用。

(3)靈敏度不高，且需要復雜的設計及優化過程。

(4)金銀納米粒子的形貌容易受環境、pH值以及谷胱甘肽等的影響，從而導致刻蝕金銀納米粒子的可視化策略容易產生假陽性信號。