[發(fā)明專利]一種基于Rh@Pt納米枝晶復(fù)合材料免疫傳感器的制備方法及應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710924116.8
• 申請日: 2017-09-30
• 公開（公告）號: CN107727858B
• 公開（公告）日: 2019-06-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王平;裴福彬;李明黨;馬恩慧;余昊軒;董云會;李月云
• 申請（專利權(quán)）人: 山東理工大學(xué)
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N33/531;G01N27/327;G01N27/416;B82Y5/00;B82Y30/00;B82Y40/00
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本發(fā)明屬于新型功能材料與生物傳感檢測技術(shù)領(lǐng)域，提供了一種基于Rh@Pt納米枝晶復(fù)合材料免疫傳感器的制備方法及應(yīng)用。具體是采用Rh@Pt納米枝晶復(fù)合材料作為標(biāo)記物，聚吡咯?金納米粒子作為基底，制備了一種電化學(xué)免疫傳感器并應(yīng)用于腫瘤標(biāo)志物抗原的檢測。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于新型功能材料與生物傳感檢測技術(shù)領(lǐng)域，提供了一種基于Rh@Pt納米枝晶復(fù)合材料免疫傳感器的制備方法及應(yīng)用。

背景技術(shù)

腫瘤的發(fā)病率高，且不易察覺，我國病例數(shù)相當(dāng)龐大，占全世界病例數(shù)的55%，且腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移的速度快，對人類的健康產(chǎn)生極大危害，然而腫瘤若在早期能夠確診治愈率還是很高的。腫瘤標(biāo)志物與腫瘤有著密切的關(guān)系，通過檢測人體血清中腫瘤標(biāo)志物的含量來推測是否患有腫瘤已經(jīng)成為一種人們廣泛認(rèn)可的方法。

目前電化學(xué)免疫傳感器已經(jīng)廣泛用于腫瘤標(biāo)志物的檢測，夾心型電化學(xué)免疫傳感器結(jié)合了高特異性的免疫分析技術(shù)和高靈敏的電化學(xué)分析技術(shù)，具有靈敏度高、制備簡單、檢測快速、成本低廉等優(yōu)點(diǎn)，在臨床檢驗(yàn)、環(huán)境監(jiān)測、食品安全控制、生物檢測等領(lǐng)域都有重要的應(yīng)用價(jià)值。

本發(fā)明中使用的Rh@Pt納米枝晶不僅具有核殼狀雙金屬的協(xié)同作用，還具有豐富的邊緣和拐角處的原子，這使得Rh@Pt納米枝晶具有優(yōu)良的催化性。氨基化石墨烯納米片具有較大的比表面積，能夠負(fù)載大量的Rh@Pt納米枝晶，同時(shí)氨基化石墨烯還具有優(yōu)良的導(dǎo)電性，能夠分散Rh@Pt納米枝晶催化還原過氧化氫所產(chǎn)生的電子，以防止由于電子聚集而引起催化反應(yīng)減緩。此外，Rh@Pt納米枝晶的引入不僅使復(fù)合材料的導(dǎo)電性性得到了明顯的提高，還能有效防止了石墨烯的堆疊。因此，Rh@Pt納米枝晶復(fù)合材料作為信號放大器能夠提高傳感器的靈敏度。聚吡咯作為導(dǎo)電聚合物，能加速電子傳導(dǎo)，在形成聚吡咯-金納米粒子后不僅具有聚吡咯的高導(dǎo)電性，還具有了良好的生物相容性，能夠很好的固載捕獲抗體，同時(shí)金納米粒子的加入進(jìn)一步提高了聚吡咯的導(dǎo)電性。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種基于Rh@Pt納米枝晶復(fù)合材料免疫傳感器的制備方法及應(yīng)用，實(shí)現(xiàn)了對腫瘤標(biāo)志物的定量檢測。

本發(fā)明的目的之一是提供一種基于Rh@Pt納米枝晶復(fù)合材料免疫傳感器的制備方法。

本發(fā)明的目的之二是將所制備的Rh@Pt納米枝晶復(fù)合材料免疫傳感器應(yīng)用于腫瘤標(biāo)志物的特異性、定量檢測。

本發(fā)明的技術(shù)方案，包括以下步驟。

1. 一種基于Rh@Pt納米枝晶復(fù)合材料免疫傳感器的制備方法，步驟如下：

（1）將直徑為3 ~ 5 mm的玻碳電極用Al₂O₃拋光粉打磨，超純水、乙醇清洗干凈；

（2）取6 μL、1 ~ 3 mg/mL的聚吡咯-金納米粒子修飾到電極表面，室溫下晾干，用超純水沖洗電極表面，晾干；

（3）繼續(xù)將6 μL、8 ~ 12 μg/mL的腫瘤標(biāo)志物捕獲抗體Ab₁滴加到電極表面，4℃冰箱中干燥；

（4）繼續(xù)將3 μL、0.5 ~ 1 wt%的牛血清白蛋白BSA溶液滴加到電極表面，用pH為7.4的磷酸鹽緩沖溶液沖洗電極表面，4℃冰箱中晾干；

（5）滴加6 μL、0.0001 ~ 5 ng/mL的一系列不同濃度的腫瘤標(biāo)志物抗原Ag溶液，用pH為7.4的磷酸鹽緩沖溶液沖洗電極表面，4℃冰箱中干燥；

（6）將6 μL、1 ~ 3 mg/mL的Rh@Pt納米枝晶復(fù)合材料腫瘤標(biāo)志物檢測抗體Rh@Pt/NH₂-GS/Ab₂溶液，滴涂于電極表面上，置于4℃冰箱中孵化40 min后用pH為7.4的磷酸鹽緩沖溶液清洗電極，4℃冰箱中干燥，制得一種基于Rh@Pt納米枝晶復(fù)合材料的免疫傳感器。