[發明專利]一株產石杉堿甲和石杉堿乙的短波單胞菌SXZ-N10菌株及用途

有效

• 申請號: 201710923780.0
• 申請日: 2017-09-30
• 公開（公告）號: CN107488619B
• 公開（公告）日: 2020-02-18
• 發明（設計）人: 張鵬;張學智;宋發軍;劉盼;裴婷;吳新廣;耿紅
• 申請（專利權）人: 中南民族大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P17/12;C12P17/18;C12R1/01
• 代理公司: 武漢華旭知識產權事務所 42214
• 代理人: 劉天鈺

本發明提供了一株產石杉堿甲和石杉堿乙的單胞菌SXZ?N10菌株，該菌株可產石杉堿甲和石杉堿乙。該菌株被命名為SXZ?N10，屬一種單胞菌，該菌株保藏于中國典型培養物保藏中心，地址：中國，武漢，武漢大學；郵編430072，保藏日期為2017年9月14日，保藏編號為：CCTCC NO：M2017512；該菌株的16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示。上述單胞菌SXZ?N10菌株能夠用于發酵制備石杉堿甲和石杉堿乙。微生物發酵條件包括：發酵培養基組成：酵母粉8g/L，蛋白胨5g/L，氯化鈉5g/L，葡萄糖10g/L，pH 6.0；培養條件為：27℃，200rpm，發酵培養7天。

技術領域

本發明涉及一種短波單胞菌菌株，該菌株可產石杉堿甲和石杉堿乙，屬于微生物技術領域。

背景技術

目前植物內生菌研究逐漸受到重視，不同植物的各種內生菌相繼被發現。內生菌種類的多樣性也賦予了其代謝產物的多樣性，這也預示著利用微生物代謝發掘生物、化學、醫藥等新資源具有巨大的潛力。大量研究表明，植物內生菌可產生與宿主植物相同或相似的活性物質及前體，這一發現直接推動了植物內生菌尤其是藥用植物內生菌研究的廣泛展開。隨著人們對藥用植物內生菌的逐步研究，利用能夠代謝產生相應活性成分的內生菌來生產新型、高效、低成本的活性藥物，解決珍稀中藥植物資源緊缺的現狀，必將成為將來藥用植物內生菌研究的重點。

蛇足石杉中的藥用活性成分石杉堿甲(Huperzine A，HupA)和石杉堿乙(Huperzine B，HupB)是一種低毒、高效抑制乙酰膽堿酯酶(Acetyl cholinesterase，AChE)的藥物，其中石杉堿甲是臨床上用來治療“阿爾茨海默癥(老年癡呆癥)”(Alzaheimerdisease，AD)的主要藥物。然而，由于蛇足石杉植物資源匱乏且生長緩慢、石杉堿甲含量很低等原因，僅依靠從蛇足石杉提取石杉堿甲無法滿足市場需求。而化學合成的石杉堿甲的活性遠低于天然石杉堿甲，且得到高光學活性的石杉堿甲成本較高。目前本領域中有一些利用蛇足石杉內生菌進行微生物發酵從而生產石杉堿甲的相關報道，但是這些菌株的種類以及產量還是無法滿足市場對于石杉堿甲的需求。

發明內容

本發明解決了背景技術中的問題，提供了一株產石杉堿甲和石杉堿乙的短波單胞菌SXZ-N10菌株，該菌株可產石杉堿甲和石杉堿乙。

本發明人篩選到一株新型菌株，該菌株被命名為SXZ-N10，屬一種短波單胞菌(Brevundimonas sp.)，該菌株保藏于中國典型培養物保藏中心，地址：中國，武漢，武漢大學；郵編430072，保藏日期為2017年9月14日，保藏編號為：CCTCC NO：M2017512；該菌株的16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示。

上述短波單胞菌SXZ-N10菌株能夠用于發酵制備石杉堿甲和石杉堿乙。微生物發酵條件包括：發酵培養基組成：酵母粉8g/L，蛋白胨5g/L，氯化鈉5g/L，葡萄糖10g/L，pH6.0；培養條件為：27℃，200rpm，發酵培養7天。

與現有技術相比，本發明具有以下優點：本發明所提供的短波單胞菌SXZ-N10菌株能夠代謝產生石杉堿甲和石杉堿乙。本發明提供的菌株可以在短期內進行大規模發酵培養，且發酵成本較低，又不受時域、季節等條件限制，因此能夠通過微生物發酵的途徑解決石杉堿甲成本較高、市場需求缺口大的現狀。同時本發明中還提供了優化后的微生物發酵條件以及培養基的配方，石杉堿甲和石杉堿乙的產量較高。

附圖說明

圖1為短波單胞菌SXZ-N10菌株的石杉堿甲和石杉堿乙的第一次HPLC檢測圖；

圖2為短波單胞菌SXZ-N10菌株的石杉堿甲和石杉堿乙的第二次HPLC檢測圖；

圖3為短波單胞菌SXZ-N10菌株的石杉堿甲的MS檢測圖；

圖4為短波單胞菌SXZ-N10菌株的石杉堿乙的MS檢測圖。