[發明專利]環狀RNA circ-PTGR1的用途

有效

• 申請號: 201710917066.0
• 申請日: 2017-09-29
• 公開（公告）號: CN107663539B
• 公開（公告）日: 2020-12-01
• 發明（設計）人: 汪國營;羅景燕;李偉琴;何繼謙;李華;張琪;楊揚;陳規劃
• 申請（專利權）人: 中山大學附屬第三醫院;廣州永諾生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;A61K48/00;A61K31/713;A61P35/00
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 宋靜娜;郝傳鑫

本發明提供了環狀RNA circ?PTGR1的用途，本發明首先證實了環狀RNA circ?PTGR1的客觀存在；通過檢測肝癌病人血清外泌體中環狀RNA circ?PTGR1表達情況，發現其表達水平上調；收集肝癌細胞系LM3分泌的外泌體與對照組PBS分別加至肝癌細胞系97L和HepG2中，其細胞遷移、細胞侵襲能力均顯著升高；干擾circPTGR1能拮抗LM3外泌體對低轉移細胞遷移、侵襲能力的促進作用。環狀RNA circ?PTGR1基因及其表達產物作為診斷肝癌的標志物，使肝癌診斷更加準確、快速，作為制備治療肝癌藥物的靶基因為治療肝癌提供了新的治療靶點和治療途徑。

技術領域

本發明涉及一種環狀RNA，具體涉及環狀RNA circ-PTGR1的用途。

背景技術

原發性肝細胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC，以下簡稱肝癌)是全球范圍內最常見的惡性腫瘤之一。全球每年約有74萬患者被新診斷為肝細胞癌，同時約有69萬患者死于肝癌。其中我國占到了全球每年新發病例的55％，成為全世界肝癌最高的地區之一。

環狀RNA(circular RNA，circRNA)是區別于傳統線性RNA的RNA家族新成員，是不具有5’末端帽子和3’末端poly(A)尾巴、并以共價鍵形成環形結構的非編碼RNA分子。最新研究表明circRNA具有閉合環狀結構，主要通過非典型可變剪切加工產生，廣泛存在于各種生物細胞中，具有結構穩定，難以被RNase R酶降解、表達豐度高、物種間保守性好、表達具有組織及時空特異性等特征，這些特點使得circRNA在新型疾病診斷與治療方法的開發應用上具有廣闊的前景。

外泌體(exosome)是脂質雙分子層膜性囊泡，是由活細胞內多泡體(multivesicular body，MVB)與細胞膜融合后釋放到細胞外隙或生物體液中，大小介于30～100nm之間，包含有蛋白質、RNA、microRNA和DNA片段等多種成分，可以調節受體細胞行為，可作為生物標志物用于診斷人類疾病。外泌體在外周血、尿液、唾液、腹水、羊水等體液中具有很高的豐度。復旦大學腫瘤研究所的黃勝林及何祥火課題組首次發現了外泌體內含有大量circRNA，外泌體中的circRNA比外泌體來源細胞中的circRNA豐富得多。血清外泌體也含有大量完整穩定的circRNA，并且結直腸癌病人血清外泌體中的circRNA與正常人差異明顯，腫瘤來源的exo-circRNA有望成為癌癥檢測的潛在生物標志物。腫瘤來源或腫瘤相關的外泌體是調控腫瘤發生發展的重要機制，對腫瘤外泌體的分析和檢測可以輔助腫瘤的早期診斷、療效評價和預后分析。

circ-PTGR1a(CircBase ID：hsa_circ_0003731)其在基因組上的定位為：chr9:114341075-114348445，相應的線性基因為PTGR1(NM_001146108)，環化序列有442個堿基，包含PTGR1基因的第五、第六和第七個外顯子。circ-PTGR1b(CircBase ID：hsa_circ_0008043)其在基因組上的定位為：chr9:114332370-114348445，相應的線性基因為PTGR1(NM_001146108)，環化序列有670個堿基，包含PTGR1基因的第五、第六、第七、第八和第九個外顯子。circ-PTGR1c(CircBase ID：hsa_circ_0088030)，其在基因組上的定位為：chr9:114337013-114348445，相應的線性基因為PTGR1(NM_001146108)，環化序列有643個堿基，包含PTGR1基因的第五、第六、第七和第八個外顯子。有報道PTGR1在肝癌中表達上調。

發明內容