[發(fā)明專利]一種N?端腦利鈉肽前體檢測試劑盒及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710915557.1
• 申請日: 2017-09-30
• 公開（公告）號: CN107748254A
• 公開（公告）日: 2018-03-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 莊慶華;丁先駿;吳澤東;吳錚;張金東;朱雨
• 申請（專利權(quán)）人: 安徽伊普諾康生物技術(shù)股份有限公司
• 主分類號: G01N33/536
• 分類號: G01N33/536;G01N33/543;G01N33/577
• 代理公司: 合肥市浩智運(yùn)專利代理事務(wù)所(普通合伙)34124
• 代理人: 王志興

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)領(lǐng)域，更具體涉及一種N-端腦利鈉肽前體檢測試劑盒及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

心血管疾病是目前危害人類健康的重要疾病之一，中國每年因該疾病入院病人在三千多萬，死于該疾病的有三百多萬人，而且每年呈上升趨勢。所以，利用合適的醫(yī)療設(shè)備對心血管疾病的診斷、治療和康復(fù)已成為一個引起全球性重視的話題。N-端腦利鈉肽前體(NT-ProBNP)是B型利鈉肽激素原分裂后無活性的N端碎片，是典型的心臟標(biāo)志物，主要在心肌細(xì)胞所受容量負(fù)荷增高時由左心室分泌。N-端腦利鈉肽前體的應(yīng)用在于協(xié)助診斷充血性心力衰竭，判斷病情的嚴(yán)重程度和預(yù)后，以及指導(dǎo)治療已經(jīng)取得了醫(yī)學(xué)界的廣泛關(guān)注。

迄今，已有多篇相關(guān)的研究論文發(fā)表于新英格蘭醫(yī)學(xué)雜志、循環(huán)醫(yī)學(xué)、美國心臟病學(xué)院雜志等權(quán)威雜志上。這些論文探討了諸如NT-ProBNP在心衰急診診斷中的作用、快速NT-ProBNP檢測用于區(qū)別充血性心衰或肺部疾患導(dǎo)致的呼吸困難的病人等問題，為心衰的診斷和評估開辟了一個嶄新的領(lǐng)域。

目前市面上檢測NT-ProBNP的試劑盒主要是以熒光免疫分析法、酶聯(lián)免疫分析法的方式進(jìn)行檢測，這些方法成本高、準(zhǔn)確度低。還需要配備特定的儀器進(jìn)行配合檢測，操作比較繁瑣。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供了一種成本低、特異性強(qiáng)、靈敏度高、準(zhǔn)確度高、穩(wěn)定性好、可定量檢測血清中N-端腦利鈉肽前體的含量的N-端腦利鈉肽前體檢測試劑盒及其應(yīng)用。

本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案解決上述技術(shù)問題的：

一方面提供一種N-端腦利鈉肽前體檢測試劑盒，包含體積比為4:1的試劑R1和試劑R2；

其中，所述試劑R1的組分及含量為：

所述試劑R2的組分及含量為：

優(yōu)選地，所述緩沖液選自HEPES緩沖液或硼酸緩沖液。

優(yōu)選地，所述防腐劑選自HY-500防腐劑或疊氮鈉。

優(yōu)選地，所述表面活性劑選自S9或曲拉通-100。

優(yōu)選地，所述膠乳微球的粒徑為80nm。

另一方面，提供上述N-端腦利鈉肽前體檢測試劑盒在檢測樣本中N-端腦利鈉肽前體的含量中的應(yīng)用。

優(yōu)選地，所述應(yīng)用通過以下步驟實(shí)現(xiàn)：

1)向比色杯中加入樣本和試劑R1，混勻，37℃孵育1分鐘，置入全自動生化分析儀中，讀取吸光度A1；

2)再向比色杯中添加試劑R2，混勻，37℃孵育5分鐘，置入全自動生化分析儀中，讀取吸光度A2；

3)根據(jù)校準(zhǔn)曲線計算出樣本中N-端腦利鈉肽前體抗原的含量。

優(yōu)選地，按體積比計，樣本：試劑R1：試劑R2＝1:80:40，且樣本、試劑R1和試劑R2的總體積至少為比色杯總體積的2/3。

檢測原理是在膠乳微球上包被N-端腦利鈉肽前體多克隆抗體，N-端腦利鈉肽前體多克隆抗體和樣本中的N-端腦利鈉肽前體抗原發(fā)生凝集反應(yīng)，形成了抗原抗體復(fù)合物并產(chǎn)生濁度，該濁度的高低與樣本中的N-端腦利鈉肽前體抗原濃度成正相關(guān)，測定其吸光度值并根據(jù)校準(zhǔn)曲線計算出N-端腦利鈉肽前體抗原的含量。

應(yīng)用本發(fā)明試劑盒，可以在日立系列、貝克曼系列、奧林巴斯系列、東芝系列、西門子系列、雅培系列、羅氏系列、希森美康系列、邁瑞系列、迪瑞系列全自動生化分析儀上進(jìn)行使用。

本發(fā)明相比現(xiàn)有技術(shù)具有以下優(yōu)點(diǎn)：

該試劑盒成本低、特異性強(qiáng)、靈敏度高、準(zhǔn)確度高、穩(wěn)定性好，可定量檢測血清中N-端腦利鈉肽前體的含量；以一株高特異性，高敏感性NT-proBNP單克隆抗體為標(biāo)記抗體，另一株單克隆抗體為捕獲抗體，結(jié)合鏈親和素-生物素放大系統(tǒng)，應(yīng)用免疫金標(biāo)層析技術(shù)，檢測人血中NT-proBNP的含量。并且具有較高的檢測靈敏度，操作簡單、快速，從檢測到出結(jié)果最多只需要5分鐘，甚至更短。

具體實(shí)施方式

下面對本發(fā)明的實(shí)施例作詳細(xì)說明，本實(shí)施例在以本發(fā)明技術(shù)方案為前提下進(jìn)行實(shí)施，給出了詳細(xì)的實(shí)施方式和具體的操作過程，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不限于下述的實(shí)施例。

所有原料均為市購原料；所有配比中，對于固體，％表示g/100mL，對于液體，％表示mL/100mL。

實(shí)施例1

一種N-端腦利鈉肽前體檢測試劑盒，包含體積比為4:1的試劑R1和試劑R2。

其中，試劑R1的組分及含量為：

試劑R2的組分及含量為：