[發明專利]一種抗CA125的納米抗體

在審

• 申請號: 201710910233.9
• 申請日: 2017-09-29
• 公開（公告）號: CN107759692A
• 公開（公告）日: 2018-03-06
• 發明（設計）人: 黃夏寧;吳文旺;吳帆;梁松;付金衡;涂追
• 申請（專利權）人: 廣西國際旅行衛生保健中心
• 主分類號: C07K16/30
• 分類號: C07K16/30;C12N15/13;G01N33/574
• 代理公司: 南寧東智知識產權代理事務所(特殊普通合伙)45117
• 代理人: 汪治興

技術領域

本發明涉及單域重鏈抗體技術（又稱納米抗體技術），以及基因工程抗體技術，特別是針對CA125的單域重鏈抗體或多肽。

技術背景

CA125 是一類大分子糖蛋白，其發現來源于1983年Bast等人用卵巢漿液性乳突囊腺癌細胞系 OVCA433，得到一株能穩定分泌特異識別卵巢癌細胞的單克隆抗體 OC125 細胞株，故將 OC125 所識別的抗原命名為癌抗原125 (cancer antigen 125，CA125)。約80%的上皮性卵巢癌患者血清CA125水平升高，血清CA125水平能夠很好的反應機體腫瘤負荷，因此CA125是婦科最常用的血清腫瘤標志物。隨著對CA125基因結構及功能的進一步深入研究，其在卵巢癌的早期診斷及生物學治療中越來越重要的作用。

目前 CA125 的檢測技術主要有放射性免疫法(RIA)，化學發光免疫法(CLIA)，酶聯免疫免疫法(ELISA)等。檢測中所使用的抗體大多是單克隆抗體和多克隆抗體，但單克隆抗體的研發和生產過程及其繁瑣和復雜，多克隆抗體來源有限，這使得檢測成本較高，不適合于基層醫院進行大規模初篩和床旁快檢。相比之下，單域重鏈抗體僅由一個結構域組成，具有耐酸堿、耐高溫、特異性高、分子量小和可大規模生產等優點。單域重鏈抗體的使用可以很大的降低成本，應用前景廣闊。

發明內容

本發明的目的是提供針對CA125的單域重鏈抗體，可以被用于制備檢測CA125的試劑和工具。

本發明提供一個抗CA125的單域重鏈抗體（即本發明一種針對CA125的納米抗體，下同），具有SEQ ID NO.:1所示的氨基酸序列。其氨基酸序列的IMGT編號和結構域的劃分包括四個框架區（Framework region, FR）和三個互補決定區（Complementarity-determining region, CDR）。

本發明提供一個核酸分子，其特征是編碼SEQ ID NO.:1，通過遺傳密碼子可以隨時獲得該核酸分子的具體序列。

本發明還提供一個核酸分子，其特征是編碼SEQ ID NO.:1部分結構域，通過遺傳密碼子可以隨時獲得該核酸分子的具體序列。可以為SEQ ID NO.:2核酸分子。

本發明所提供的核苷酸序列或者至少部分序列可以通過合適的表達系統進行表達以得到相應的蛋白質或多肽。這些表達系統包括細菌，酵母菌，絲狀真菌，動物細胞，昆蟲細胞，植物細胞，或無細胞表達系統。

本發明還提供一種載體，包含所述核酸序列。由于遺傳密碼子具有簡并性，該核酸序列可以根據不同的應用目的而不同。

本發明還提供一種宿主細胞，包括所述蛋白質或表達載體。

本發明還提供一種檢測CA125的方法，含有本發明所述針對CA125的單域重鏈抗體。基于本發明提供的針對CA125的單域重鏈抗體與CA125特異性結合的能力，建立CA125的檢測方法。其中，優選的方法包括酶聯免疫吸附法（Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA），熒光免疫法（Fluoroimmunoassay, FIA），免疫芯片法，親和層析法和免疫層析法等。

本發明所提供的氨基酸序列可以作為前體，通過隨機或定點突變技術進行改造，能夠獲得性質（水溶性、穩定性、親和力以及特異性等）更好的突變體，該突變體能與CA125特異性結合。

本發明所敘述的一些術語具有如下含義：

結構域：蛋白質三級結構的基本結構單位，通常具有一定的功能。