[發明專利]微流控基因檢測芯片

有效

• 申請號: 201710908122.4
• 申請日: 2017-09-29
• 公開（公告）號: CN107629951B
• 公開（公告）日: 2021-03-02
• 發明（設計）人: 顧大勇;夏贇;何建安;徐云慶;史蕾;劉春曉;趙純中
• 申請（專利權）人: 深圳國際旅行衛生保健中心;深圳市檢驗檢疫科學研究院
• 主分類號: C12M1/34
• 分類號: C12M1/34;C40B40/06
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 生啟

本發明涉及一種微流控基因檢測芯片，包括加樣池、分樣元件和檢測元件，檢測元件包括裝載細菌檢測劑的檢測池、裝載立克次體檢測劑的檢測池、裝載病毒檢測劑的檢測池、裝載真菌檢測劑的檢測池和裝載生物毒素檢測劑的檢測池。一次上樣能夠同時檢測多種類型病原微生物，樣品處理步驟簡單，檢測效率高，同時加樣量容易控制，進入每個檢測池中的待檢測液體積相等，檢測結果更加準確，滿足口岸衛生檢疫高效率、大樣本量病原微生物快速檢測排查的應用要求。

技術領域

本發明涉及生物檢測技術領域，特別是涉及一種微流控基因檢測芯片。

背景技術

高致病性病原微生物大多數具有感染力強、傳播快、潛伏期短和發病急等特點，所引起的疾病病原學復雜，給人類的健康、社會的穩定以及畜牧業安全等帶來極大的威脅。當前，一些高致病性病原微生物已經跨越了種屬之間的障礙，不定期在人類中爆發成為越來越常見的現象。由于口岸衛生檢疫對象的復雜性、流動性，以及潛在高致病性病原微生物的未知性，多變性等眾多因素，快速檢測高致病性病原微生物非常有必要。

傳統的檢測方法主要有直接涂片鏡檢、分離培養等。然而依靠病原體微生物體外培養的顯微檢驗方法耗時長，操作繁復，效率與通量也不理想。深入到分子水平和基因水平的檢測手段不斷出現并被廣泛應用。其中具有代表性的是基于聚合酶鏈式反應(PCR，Polymerase chain reaction)和抗原抗體反應基礎之上發展的系列檢測方法。但傳統的免疫檢測技術存在的問題是難以對病原微生物感染的窗口期檢出，即使感染者體內已感染了病毒，但由于病毒拷貝數少、病毒的抗體豐度低，往往檢查病毒抗體的結果呈陰性而造成漏診。實時熒光定量PCR技術是目前病原微生物核酸分子檢測的主流方法，此方法特異性強，但是一次實驗只能檢測一種病原目標物，檢測通量較低，同時檢測大量的病原目標物則不能很好地應付。這兩種方法在檢測多種病原微生物時，往往都需要耗費較長的時間，這也延誤了診斷和治療的最佳時機。

綜上，傳統的檢測產品自動化程度不高，檢測效率低，檢測結果不準確。遠遠不能滿足口岸衛生檢疫高效率、大樣本量病原微生物快速檢測排查的應用要求。

發明內容

基于此，有必要提供一種檢測效率高、檢測結果準確的微流控基因檢測芯片。

一種微流控基因檢測芯片，包括：

加樣池；

分樣元件，包括弧形通道和多個分樣緩沖池，所述弧形通道與所述加樣池連通，所述多個分樣緩沖池位于所述弧形通道的外側且沿所述弧形通道的周向依次排布，且所述分樣緩沖池沿所述弧形通道的徑向自所述弧形通道的外周緣向外延伸，所述多個分樣緩沖池的體積相等，且從所述弧形通道的進口端至出口端方向所述分樣緩沖池的深度依次減小；及

檢測元件，包括裝載細菌檢測劑的檢測池、裝載立克次體檢測劑的檢測池、裝載病毒檢測劑的檢測池、裝載真菌檢測劑的檢測池和裝載生物毒素檢測劑的檢測池，所述檢測池與所述分樣緩沖池通過毛細管連通。

在一個實施方式中，所述檢測元件包括分別裝載如下檢測劑的檢測池，每一組所述檢測劑中均包括上游引物、下游引物和探針；

第1組檢測劑：用于檢測炭疽芽孢桿菌，上游引物的序列如SEQ ID No.1所示，下游引物序列如SEQ ID No.2所示，探針序列如SEQ ID No.3所示；

第2組檢測劑：用于檢測布魯氏桿菌，上游引物序列如SEQ ID No.4所示，下游引物序列如SEQ ID No.5所示，探針序列如SEQ ID No.6所示；

第3組檢測劑：用于檢測鼻疽伯克氏菌，上游引物序列如SEQ ID No.7所示，下游引物序列如SEQ ID No.8所示，探針序列如SEQ ID No.9所示；

第4組檢測劑：用于檢測土拉弗氏菌，上游引物序列如SEQ ID No.10所示，下游引物序列如SEQ ID No.11所示，探針序列如SEQ ID No.12所示；