[發明專利]一種糖基轉移酶及其克隆表達方法與應用

有效

• 申請號: 201710906561.1
• 申請日: 2017-09-29
• 公開（公告）號: CN107746835B
• 公開（公告）日: 2020-05-08
• 發明（設計）人: 江仁望;文超;黃偉;朱雪林;朱自榮
• 申請（專利權）人: 暨南大學
• 主分類號: C12N9/10
• 分類號: C12N9/10;C12P33/20
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 陳燕嫻

1.一種糖基轉移酶，其特征在于：

所述的糖基轉移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根據權利要求1所述的糖基轉移酶，其特征在于，編碼所述的糖基轉移酶的核苷酸序列選自如下（1）、（2）或（3）:

（1）如SEQ ID NO. 2所示的核苷酸序列；

（2）與SEQ ID NO. 2所示的核苷酸序列不同，但是編碼如SEQ ID NO. 1所示的氨基酸序列的核苷酸序列；

（3）與（1）或（2）任一項所述的核苷酸序列互補的核苷酸序列。

3.一種重組表達載體，其特征在于：

含有權利要求2所述的編碼所述的糖基轉移酶的核苷酸序列的重組表達載體。

4.一種基因工程化的宿主細胞，其特征在于：

所述的基因工程化的宿主細胞轉化了如權利要求3所述的重組表達載體或者基因組上整合了如權利要求2所述的核苷酸序列的宿主細胞及其后代細胞；當所述宿主細胞屬于植物細胞時，該植物細胞不屬于可以借助光合作用，以水、二氧化碳和無機鹽等無機物合成碳水化物、蛋白質來維系生存，并通常不發生移動的生物，即不屬于植物品種。

5.權利要求1或2所述的糖基轉移酶的克隆表達方法，其特征在于，包括如下步驟：

將編碼所述的糖基轉移酶的核苷酸序列克隆入表達載體中構建重組表達載體；再將所述的重組表達載體轉入表達系統中進行異源表達；最后經純化得到所述的糖基轉移酶。

6.權利要求3所述的重組表達載體或權利要求4所述的基因工程化的宿主細胞在表達所述的糖基轉移酶中的應用。

7.權利要求1或2所述的糖基轉移酶的應用，其特征在于：

所述的糖基轉移酶在制備糖基化修飾的化合物中的應用。

8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于：

所述的化合物為強心甾類化合物。

9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于：所述的強心甾類化合物為洋地黃毒苷元、酯蟾毒配基、華蟾蜍它靈、沙蟾毒精、蟾毒靈、3α-蟾毒靈。

10.根據權利要求7～9任一項所述的應用，其特征在于：

所述的糖基化修飾為對強心甾類化合物C3位羥基進行糖基化修飾。