[發明專利]從動物硬質骨中采用酸?酶結合提取I型膠原蛋白的方法

在審

• 申請號: 201710904024.3
• 申請日: 2017-09-29
• 公開（公告）號: CN107400692A
• 公開（公告）日: 2017-11-28
• 發明（設計）人: 張春暉;李俠;賈偉;胡金保;王寶龍;李春秀
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院農產品加工研究所;上海本優機械有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K14/78;C07K1/14
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理事務所(普通合伙)11369
• 代理人: 史霞

1.一種從動物硬質骨中采用酸-酶結合提取I型膠原蛋白的方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟一、對骨原料進行前處理，之后用鹽酸進行脫鈣處理，所述鹽酸濃度0.01～0.02mol/L，浸泡時間為10～12h，浸泡過程中攪拌轉速為12～24rpm；脫鈣處理之后清洗至pH 3～5；

步驟二、對所述步驟一所得的物料進行加熱蒸煮，蒸煮溫度90～95℃，2～3h；

步驟三、將所述步驟二所得的物料冷卻，加入蛋白酶酶解，所述蛋白酶為胃蛋白酶，添加量為所述骨原料的3～5‰，酶解溫度為50～55℃，酶解時間5～7h，保持在pH5～7；

步驟四、從所述步驟三所得的物料分離得到酶解液；

步驟五、對所述步驟四得到的酶解液進行后處理，得到骨I型膠原蛋白粉。

2.如權利要求1所述的從動物硬質骨中采用酸-酶結合提取I型膠原蛋白的方法，其特征在于，所述步驟一中，對骨原料進行前處理，其具體包括：將骨原料去脂，其中，所述去脂采用氫氧化鈉溶液，所述氫氧化鈉溶液的濃度為0.5～0.8mol/L，浸泡時間為6～7h，浸泡過程中攪拌轉速為12～24rpm。

3.如權利要求1所述的從動物硬質骨中采用酸-酶結合提取I型膠原蛋白的方法，其特征在于，所述步驟四中，從所述步驟三所得的物料分離得到酶解液，其具體過程包括：對所述步驟三得到的物料進行三相分離，分離過程分為兩步，先進行固液分離，將分離得到的固相無機物殘渣去除后再進行酶解液和骨油分離。

4.如權利要求1所述的從動物硬質骨中采用酸-酶結合提取I型膠原蛋白的方法，其特征在于，所述步驟五中，對所述步驟四得到的酶解液進行后處理，其具體包括以下步驟：對所述步驟四得到的酶解液進行滅酶滅菌處理，脫色脫鹽處理，濃縮處理，濃縮后滅菌處理以及噴霧干燥處理。

5.如權利要求4所述的從動物硬質骨中采用酸-酶結合提取I型膠原蛋白的方法，其特征在于，所述滅酶滅菌處理的溫度為125～130℃，10～15s；所述脫色脫鹽處理的具體過程包括：通過活性炭柱脫色，經過滅酶滅菌處理的酶解液的流速為4～6倍外水體積，再通過陰陽離子樹脂柱進行脫鹽處理，滅酶滅菌處理的酶解液的流速為6～8倍外水體積。

6.如權利要求4所述的從動物硬質骨中采用酸-酶結合提取I型膠原蛋白的方法，其特征在于，所述濃縮處理的具體過程包括：對經過脫色脫鹽處理的酶解液通過納濾膜濃縮至濃度Brix10～15°，再通過雙效降膜濃縮至濃度Brix40～45°。

7.如權利要求4所述的從動物硬質骨中采用酸-酶結合提取I型膠原蛋白的方法，其特征在于，所述濃縮后滅菌處理的具體過程包括：將濃縮液送入保溫儲存罐巴氏滅菌90～95℃，10～15min。

8.如權利要求4所述的從動物硬質骨中采用酸-酶結合提取I型膠原蛋白的方法，其特征在于，所述噴霧干燥處理的具體過程包括：濃縮后滅菌處理的料液送入噴霧塔，進風溫度180～185℃，排風溫度80～90℃，干燥至成品水分不大于5.0％。

9.如權利要求1所述的從動物硬質骨中采用酸-酶結合提取I型膠原蛋白的方法，其特征在于，所述步驟三中，在酶解過程中，所述蛋白酶分兩次加入，第一次加入蛋白酶，添加量為所述步驟二所得物料質量的0.2～0.5‰，酶解溫度為50～55℃，保持在pH5～7，酶解時間為20～40min；之后再第二次加入蛋白酶，酶解溫度為50～55℃，保持在pH5～7，兩次加入蛋白酶的添加量合計為所述步驟二所得物料質量的3～5‰，兩次酶解時間合計為5～7h。