[發明專利]一種香蕉枯萎病菌培養基及其應用

有效

• 申請號: 201710903818.8
• 申請日: 2017-09-29
• 公開（公告）號: CN107641599B
• 公開（公告）日: 2021-04-23
• 發明（設計）人: 聶燕芳;李云鋒;李華平;周玲菀;陳敏;王振中
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N3/00;C12P21/00;C12R1/77
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 單香杰

本發明公開了一種香蕉枯萎病菌培養基及其應用，所述培養基含有以下組分：葡萄糖的終濃度為10 g/L，天冬氨酸的終濃度為2～8 g/L，20×硝酸鹽、200×鐵鹽、1000×維生素、1000×微量元素的體積分數分別為5%、0.5%、0.1%、0.1%；所述培養基的pH值為6.2～6.5。本發明提供的培養基既能促進香蕉枯萎病菌分生孢子的萌發，又能避免外源大分子蛋白質的干擾，有利于香蕉枯萎病菌分泌蛋白質的分析。

技術領域

本發明涉及微生物培養技術領域，具體地，涉及一種香蕉枯萎病菌培養基及其應用。

背景技術

香蕉枯萎病是由尖孢鐮刀菌古巴專化型（Fusarium oxysporum f. sp. cubense，Foc）引起的一種真菌性病害，是香蕉生產上最重要的病害之一，在我國幾乎所有的香蕉產區都有發生，發病蕉園的發病率一般為30～50%，重病區可達90%以上，嚴重威脅香蕉產業的可持續性發展。Foc主要通過分生孢子從香蕉的根部或傷口入侵，再進入維管束生長繁殖，進而導致香蕉維管束細胞褐變壞死，最終導致香蕉整株枯萎。由于Foc遺傳背景復雜，目前對于其致病性機制仍不清楚。分泌蛋白質是指在細胞內合成后分泌到細胞外起作用的蛋白質，是植物病原真菌的一類重要致病因子；分泌蛋白在病原真菌對寄主植物的侵入、定殖和擴展等致病過程中均具有重要作用。因此，開展香蕉枯萎病菌分泌蛋白質的研究有利于分析Foc的致病機理。但是，目前對于香蕉枯萎病菌分泌蛋白質的分析尚缺乏成熟的研究體系，而培養基的成分對Foc分生孢子的萌發和分泌蛋白質的分析有很重要的影響。

目前常用的Foc培養基有：PDA培養基（馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、瓊脂粉20 g，用蒸餾水定容至1 L）；查氏培養基（NaNO₃ 3 g、K₂HPO₄ 1 g、KCl 0.5 g、MgSO₄·7H₂O 0.5 g、FeSO₄·7H₂O 0.018 g、蔗糖30 g，用蒸餾水定容至1 L，pH 6.0）；CM培養基（葡萄糖10 g、蛋白胨2 g、酵母浸膏1 g、酪蛋白水解物1 g、20×硝酸鹽50 mL、1000×維生素1 mL、1000×微量元素1 mL，用蒸餾水定容至1 L，pH 6.5）；Bilai’s培養基（KH₂PO₄ 1 g、KNO₃ 1 g、KCl 0.5g、MgSO₄·7H₂0 0.5 g、淀粉0.2 g、葡萄糖0.2 g、蔗糖0.2 g，用蒸餾水定容至1 L）。在這些現有的香蕉枯萎病菌培養基中，有多種因素干擾Foc分泌蛋白質的研究：其中，PDA培養基和CM培養基中的部分組分（馬鈴薯、蛋白胨和酵母浸膏等）含有復雜的蛋白質組分；含無機鹽的培養基（查氏培養基和Bilai’s培養基），則存在Foc分生孢子萌發率偏低的問題，這些因素均是干擾Foc分泌蛋白質分析的重要因素。而現有技術中，尚未見文獻和專利報道既適合于香蕉枯萎病菌分生孢子萌發同時又有利于其分泌蛋白質分析的培養基。

發明內容

本發明為了克服現有技術的上述不足，提供一種香蕉枯萎病菌培養基，本發明所提供的培養基既能促進香蕉枯萎病菌分生孢子的萌發，又能避免外源大分子蛋白質的干擾，有利于香蕉枯萎病菌分泌蛋白質的分析。

本發明的另一目的是提供上述培養基在提高香蕉枯萎病菌孢子萌發率以及在香蕉枯萎病菌分泌蛋白質分析中的應用。

為了實現上述目的，本發明是通過以下方案予以實現的：

一種香蕉枯萎病菌培養基，含有以下組分：葡萄糖的終濃度為10 g/L，天冬氨酸的終濃度為2～8 g/L，20×硝酸鹽、200×鐵鹽、1000×維生素、1000×微量元素的體積分數分別為5%、0.5%、0.1%、0.1%，去離子水余量；所述培養基的pH值為6.2～6.5。