[發明專利]一種海參腸卵中生物活性成分集成提取的工藝

在審

• 申請號: 201710895867.1
• 申請日: 2017-09-28
• 公開（公告）號: CN107853620A
• 公開（公告）日: 2018-03-30
• 發明（設計）人: 宋志鳳;黃祥賢;續彥龍
• 申請（專利權）人: 大連豪翔生物酶工程有限公司
• 主分類號: A23L17/00
• 分類號: A23L17/00;A23L33/00;A23L5/20;A23P10/30
• 代理公司: 北京科家知識產權代理事務所(普通合伙)11427
• 代理人: 陳娟

技術領域

本發明涉及一種海參腸卵中生物活性成分集成提取的工藝，具體為生物科技技術領域。

背景技術

海參腸卵，俗稱“海參籽”，在日本稱為“海參花”。海參腸卵不僅含有與海參體壁同樣豐富的營養成分，而且許多珍貴的關鍵營養含量更多，決定了海參腸卵的至尊價值。其中多糖含量是刺參體壁的3-4倍，釩的含量是刺參體壁的3倍；海參腸卵內還含有特有的成分——性腺色素(β-胡蘿卜素、海膽紫酮、蝦青素(也稱蝦紅素、玉米黃質、角黃素以及一些未知色素)。在滋補、防治和輔助治療三方面的價值，可謂千金難尋的“無價之寶”。

王共明(2013)研究：(1)仿刺參營養較均衡，其中干品粗蛋白含量達到50.72g/100g，粗多糖含量高達27.25g/100g，粗脂肪中多以磷脂形式存在。高效液相色譜分析仿刺參卵氨基酸組成，總氨基酸和必需氨基酸的總量分別為34.71％和17.62％，必需氨基酸和總氨基酸比值高達50.77％(遠高于WHO和FAO規定EA/TA≥40％為優質蛋白源)；(2)仿刺參卵的最佳酶解工藝為：以混合酶1.5％，45℃酶解1h，水解度達到77.11％；(3)仿刺參卵多糖經純化后發現在190nm到200nm處有強烈單一吸收峰，分子質量大于200kDa。

趙鴻霞等(2010)研究，以水解度和肽得率為評價指標，從4種酶解篩選出木瓜蛋白酶為水解最佳用酶，其條件為溫度52℃，pH5.5，底物濃度為8-4％，加酶量為2500u/g，時間4h，在此條件下水解度為20.51％。

楊利偉(2012)研究了中類胡蘿卜素的組成和含量并優化了提取工藝。分光光度法定量分析表明海參卵中總類胡蘿卜素的含量為113μg/g。；高效液相色譜法測定蝦青素的含量23μg/g。，占總類胡蘿卜素的20.3％。有機溶劑法提取工藝條件為：以乙酸乙酯為提取劑，提取溫度40℃，提取時間3h，料液比1：10，類胡蘿卜素含量可達62.3μg/g；超聲提取的工藝為：超聲功率為70W，超聲時間40min，類胡蘿卜素含量為70.1μg/g；皂化處理法提取工藝為：皂化用堿0.2M NaoH，加堿量2-4μg/g，皂化時間50min，溫度40℃，類胡蘿卜素含量為72.3μg/g；發酵法提取工藝為：微生物黑曲霉84g，接種量8％，發酵時間3d，類胡蘿卜素含量可達85.3μg/g；酶法提取工藝條件：脂肪酶加量8％，35℃反應35min，類胡蘿卜素含量可達92.6μg/g。

楊利偉等(2013)研究，海參卵中類胡蘿卜素提取條件的優化，以乙酸乙酯為提取溶劑，二次提取，溫度40℃，提取時間3h，料液比為1：12，類胡蘿卜素提取質量分數為63.20μg/g。

張婕(2014)研究海參腸卵提取物對雌性小鼠生殖系統的影響作用，結果發現(1)水溶液超聲輔助提取,液料比1.5倍,.30'C條件下超聲25min,提取2h,提率為8.1％；有機溶劑提取,液料比10倍,30℃條件下提取3h,提率為20.3％；(2)海參花提取物通過提高小鼠血清中激素含量,增加臟器指數和子宮內膜厚度,同時增加卵泡數量,改善卵巢形態,保護小鼠的生殖系統；(3)海參花提取物通過增加總蛋白含量,提高SOD、GSH-Px的活性,降低MDA的活性,抑制脂質過氧化反應,可能是它抗氧化能力的機制；(4)海參花提取物可以通過抑制Bax、Caspase-3的表達,增加Bcl-2的表達,抑制細胞凋亡。

劉昕(2016)以仿刺參卵為原料提取多糖，在單因素實驗的基礎上，通過響應面分析優化雙酶提取仿刺參卵多糖工藝，并對其體外抗氧化活性進行初步研究。結果表明:仿刺參卵多糖的最佳提取條件為復合蛋白酶與木瓜蛋白酶配比1∶2、加酶量2.78％、酶解溫度60℃、酶解時間6h，在此條件下卵多糖的預測得率為8.84‰，實際得率為8.76‰；仿刺參卵多糖的自由基清除活性呈明顯的劑量依賴關系，對DPPH自由基的IC₅₀為1.71mg/mL，是一種良好的天然抗氧化劑。

綜敘上述對海參腸卵的研究，仍有如下不足：

(1)對海參腸卵的酶解用酶多采用單酶或是雙酶酶解，導致酶解收率偏低；

(2)對酶解產物沒有進行分子量測定，因此無法評價該產品的消化吸收率。

(3)酶解液未經精制、脫腥，可能影響口感。

(4)對海參腸卵的研究只是對單一物質的提取，而沒有在一條工藝上最大限度的將其活性物質綜合考慮提取，造成海參腸卵資源的浪費。

發明內容

本發明的目的在于提供一種海參腸卵中生物活性成分集成提取的工藝，以解決上述背景技術存在的問題。