[發(fā)明專(zhuān)利]用于在體內(nèi)將癌癥細(xì)胞重編程為非癌癥細(xì)胞的方法及其用途

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710889468.4
• 申請(qǐng)日: 2017-09-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108465109A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-08-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 魯曉華;楊佳銀;周敏;劉雨晴;閆玉波
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 深圳市三啟生物技術(shù)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): A61K45/06
• 分類(lèi)號(hào): A61K45/06;A61P35/00
• 代理公司: 北京彩和律師事務(wù)所 11688
• 代理人: 閆桑田

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，特別是將癌癥細(xì)胞重編程為非癌癥細(xì)胞。具體而言，本申請(qǐng)?zhí)峁┯糜趯┌Y細(xì)胞重編程為非癌癥細(xì)胞的混合物(cocktail)和方法。本申請(qǐng)的方法涉及將所述重編程混合物施用至腫瘤部位用于將惡性腫瘤細(xì)胞直接重編程為非惡性細(xì)胞。更具體而言，本公開(kāi)涉及的方法包括將封裝的(encapsulated)重編程混合物施用至受試者中的腫瘤部位，特別是膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(GBM)處，以誘導(dǎo)GBM成為非惡性的神經(jīng)元和/或膠質(zhì)細(xì)胞。本公開(kāi)還涉及制備所述混合物的方法，例如制備含有一種或多種蛋白激酶抑制劑的重編程混合物的方法。

發(fā)明領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，特別是將癌癥細(xì)胞重編程為非癌癥細(xì)胞。具體而 言，本申請(qǐng)?zhí)峁┯糜趯┌Y細(xì)胞重編程為非癌癥細(xì)胞的混合物(cocktail)和方法。 本申請(qǐng)的重編程混合物包括化學(xué)或生物作用劑，例如小分子，其能夠誘導(dǎo)、實(shí)現(xiàn) 或促進(jìn)癌癥細(xì)胞重編程為非癌癥細(xì)胞。本申請(qǐng)的方法涉及將所述重編程混合物施 用至腫瘤部位用于將惡性腫瘤細(xì)胞直接重編程為非惡性細(xì)胞。更具體而言，本公 開(kāi)涉及的方法包括將封裝的(encapsulated)重編程混合物施用至受試者中的腫瘤 部位，特別是膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(GBM)處，以誘導(dǎo)GBM成為非惡性的神經(jīng)元和/或膠 質(zhì)細(xì)胞。本公開(kāi)還涉及制備所述混合物的方法，例如制備含有一種或多種蛋白激 酶抑制劑的重編程混合物的方法。

背景技術(shù)

通過(guò)細(xì)胞重編程將已經(jīng)分化的體細(xì)胞轉(zhuǎn)化成疾病相關(guān)的干細(xì)胞類(lèi)型為基礎(chǔ) 研究和重編程藥物開(kāi)啟了新的大門(mén)¹。過(guò)去，沒(méi)有將一種類(lèi)型的細(xì)胞轉(zhuǎn)化成另一 種類(lèi)型的細(xì)胞的可靠方法。Takahashi等人(2006)證明了過(guò)表達(dá)限定的轉(zhuǎn)錄因子能 夠驅(qū)動(dòng)皮膚衍生的成纖維細(xì)胞成為誘導(dǎo)的多能干細(xì)胞(induced pluripotent stem cells,即iPS或iPSC)，其能夠進(jìn)一步分化成期望的細(xì)胞類(lèi)型。誘導(dǎo)的多能干細(xì)胞 在形態(tài)學(xué)、增殖、基因表達(dá)概貌和其他特性方面與胚胎干細(xì)胞類(lèi)似，因此在再生 醫(yī)學(xué)中具有應(yīng)用前景。

基于體細(xì)胞重編程的這一新概念，將一種細(xì)胞類(lèi)型轉(zhuǎn)化成另一種細(xì)胞類(lèi)型而 不生成iPSC的直接重編程領(lǐng)域作為一種新的再生醫(yī)學(xué)策略出現(xiàn)(參考文件2‐11)。 直接的細(xì)胞轉(zhuǎn)化相對(duì)于許多已經(jīng)提出的用于疾病建模和開(kāi)發(fā)基于細(xì)胞的療法兩 方面的iPSC技術(shù)應(yīng)用而言提供了一種可選的、潛在為互補(bǔ)性的工具。與iPSC相 比，直接重編程在從起始細(xì)胞類(lèi)型到達(dá)期望細(xì)胞類(lèi)型的過(guò)程中抄了近路，并且具 有多種優(yōu)勢(shì)：1)直接重編程略去了生成、擴(kuò)張和分化iPSC細(xì)胞所需要的時(shí)間， 并且因此顯著減少了生成靶細(xì)胞類(lèi)型的時(shí)間，將其從數(shù)個(gè)月縮短為數(shù)周；并且 2)從一種體細(xì)胞類(lèi)型到另一種體細(xì)胞類(lèi)型消除了關(guān)于iPSC的安全性顧慮，如潛在 的腫瘤形成，并且因此更適合于臨床應(yīng)用。

除了生成iPSC，體細(xì)胞重編程技術(shù)還提供了一種新的癌癥研究平臺(tái)。重編程 和致癌轉(zhuǎn)化二者均為分步過(guò)程，享有多種相似性。因此，將癌癥細(xì)胞重編程為iPSC 是一種研究癌癥相關(guān)基因和這些基因與細(xì)胞環(huán)境之間在重編程之前和之后的相 互作用的令人感興趣的手段，由此來(lái)闡明癌癥發(fā)展不同階段的機(jī)理。將實(shí)體和液 體腫瘤二者重編程為iPSC已經(jīng)被多個(gè)小組報(bào)道(參考文件16、18‐27)。通過(guò)未知 機(jī)制導(dǎo)致的致腫瘤性的喪失以及誘導(dǎo)的去分化為多能性似乎是來(lái)自不同癌癥的 重編程細(xì)胞的共同特征。然而，魯棒地(robust)分化成特定品系仍然是個(gè)障礙(參 考文件28‐32)。另一方面，癌癥細(xì)胞直接編程為非癌癥(“正常”)細(xì)胞提供了一 種具有前景的癌癥治療和預(yù)防策略，特別是在預(yù)防手術(shù)后癌癥復(fù)發(fā)方面。在之前 的研究中，我們和其他人發(fā)現(xiàn)衰老是細(xì)胞重編程和致癌轉(zhuǎn)化二者的障礙(參考文 件12‐17)。因此，我們假設(shè)癌癥細(xì)胞能夠在限定的重編程條件下被重編程為特定非癌癥細(xì)胞。