[發明專利]提高thaxtomin發酵產量的方法有效
| 申請號： | 201710886608.2 | 申請日： | 2017-09-27 |
| 公開（公告）號： | CN109554415B | 公開（公告）日： | 2022-04-29 |
| 發明（設計）人： | 婁春波;趙學金 | 申請（專利權）人： | 中國科學院微生物研究所 |
| 主分類號： | C12P17/16 | 分類號： | C12P17/16;C12N1/21;C12R1/465;C12R1/47;C12R1/61 |
| 代理公司： | 北京信慧永光知識產權代理有限責任公司 11290 | 代理人： | 朱學珺;董世豪 |
| 地址： | 100101 北*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 提高 thaxtomin 發酵 產量 方法 | ||
1.一種生產thaxtomin的方法，所述方法包括在異源鏈霉菌中表達酸性瘡痂鏈霉菌的TxtA、TxtB、TxtC、TxtD以及TxtE，以及對所述異源鏈霉菌進行發酵；其中，所述異源鏈霉菌選自于如下的任一種鏈霉菌：天藍色鏈霉菌以及白色鏈霉菌；
所述thaxtomin選自于由如下化合物所組成的組中的一種：thaxtomin A、thaxtomin B以及thaxtomin D。
2.如權利要求1所述的方法，其中，將酸性瘡痂鏈霉菌的thaxtomin基因簇整體轉化入所述異源鏈霉菌，實現在所述異源鏈霉菌中表達酸性瘡痂鏈霉菌的TxtA、TxtB、TxtC、TxtD以及TxtE。
3.如權利要求2所述的方法，其中，所述thaxtomin基因簇包含酸性瘡痂鏈霉菌染色體的132205bp-156019bp的序列。
4.如權利要求1所述的方法，其中，將編碼TxtA、TxtB、TxtC、TxtD以及TxtE的各片段轉化入所述異源鏈霉菌，實現在所述異源鏈霉菌中表達酸性瘡痂鏈霉菌的TxtA、TxtB、TxtC、TxtD以及TxtE。
5.如權利要求1所述的方法，其中，所述在異源鏈霉菌中表達酸性瘡痂鏈霉菌的TxtA、TxtB、TxtC、TxtD以及TxtE的步驟進一步包括：在txtAB和txtED操縱子的上游添加鏈霉菌組成型啟動子，其中，txtA和txtB合稱為txtAB，txtD和txtE合稱為txtED。
6.如權利要求1所述的方法，其中，所述在異源鏈霉菌中表達酸性瘡痂鏈霉菌的TxtA、TxtB、TxtC、TxtD以及TxtE的步驟進一步包括：在txtAB、txtED和txtC操縱子的上游添加鏈霉菌組成型啟動子，其中，txtA和txtB合稱為txtAB，txtD和txtE合稱為txtED。
7.如權利要求1所述的方法，其中，所述在異源鏈霉菌中表達酸性瘡痂鏈霉菌的TxtA、TxtB、TxtC、TxtD以及TxtE的步驟進一步包括：在所述酸性瘡痂鏈霉菌的txtA、txtB、txtC、txtD以及txtE的CDS的上游添加鏈霉菌組成型啟動子。
8.如權利要求5-7中任一項所述的方法，其中，在txtA的CDS上游第1bp-1000bp處的任一位置添加鏈霉菌組成型啟動子。
9.如權利要求8所述的方法，其中，在txtA的CDS上游第30-100bp處的任一位置添加鏈霉菌組成型啟動子。
10.如權利要求5-7中任一項所述的方法，其中，在txtE的CDS上游第1bp-1000bp處的任一位置添加鏈霉菌組成型啟動子。
11.如權利要求10所述的方法，其中，在txtE的CDS上游第30-100bp處的任一位置添加鏈霉菌組成型啟動子。
12.如權利要求6或7所述的方法，其中，在txtC的CDS上游第1bp-1000bp處的任一位置添加鏈霉菌組成型啟動子。
13.如權利要求12所述的方法，其中，在txtC的CDS上游第30-100bp處的任一位置添加鏈霉菌組成型啟動子。
14.如權利要求5-7中任一項所述的方法，其中，所述鏈霉菌組成型啟動子選自于由如下啟動子所組成的組：ermEp系列啟動子、SF14P啟動子、kasOP系列啟動子。
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