[發明專利]一種紫背菜多糖多酚聯合制備方法

有效

• 申請號: 201710880992.5
• 申請日: 2017-09-26
• 公開（公告）號: CN107686473B
• 公開（公告）日: 2019-09-13
• 發明（設計）人: 付才力;陳雨濃;劉前;王梅;郭雅靖
• 申請（專利權）人: 福州大學
• 主分類號: C07D311/62
• 分類號: C07D311/62;C08B37/00
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

1.一種紫背菜多糖多酚聯合制備方法，其特征在于：包括如下步驟：

（1）將新鮮紫背菜摘除掉壞葉、老梗以及蟲洞的葉片后，洗凈之后剁碎，裝于密封袋，4℃冰箱中保存備用；

（2）準確稱取剁碎后的紫背菜新鮮葉，按固液比1:4 g/mL加入50%乙醇水溶液，在45℃的條件下于搖床中提取3h，粗過濾后，收集濾液及濾渣；將濾渣再以1:2 g/mL的固液比添加50%乙醇水溶液在相同的條件下重復提取一次，經粗過濾后進行抽濾，并將兩次的提取液合并；混勻后，用真空旋轉蒸發器進行濃縮直至體積為原來體積的1/6，將濃縮粗提液用棕色試劑瓶裝好后，置于冰箱保鮮層保藏備用；

（3）取濃縮液，加入3倍體積的95%的乙醇溶液，混勻后，150r/min磁力攪拌30min，保鮮膜封蓋燒杯口，常溫靜置過夜；將其混合液6000r/min離心10min，分別收集沉淀和上清液，沉淀是粗多糖物質，上清液需進一步處理得到多酚物質；

（4）將沉淀配制濃度為2-3mg/mL的粗多糖溶液100mL，添加酶量為1000U/g的中性蛋白酶，調節pH=7，在50℃酶條件下，酶解2h；將經脫蛋白處理后的溶液，6000r/min離心10min，收集沉淀，為紫背天葵多糖；

（5）將步驟（3）醇沉離心后的上清液一半在45℃下進行旋蒸，濃縮到50ml過濾后，將濾液經Sephadex LH 20柱層析連續純化，先經1000ml 50%的乙醇溶液洗脫，后用500ml 70%丙酮水溶液洗脫，丙酮洗脫液經45℃旋轉蒸發，并放入-20℃冰箱保存2h，再在-80℃冰箱保存4h后進行冷凍干燥，得到紫背菜原花青素；

（6）將醇沉離心后的剩余上清液也在45℃下進行旋蒸，濃縮到50ml過濾后，將濾液經SepPakC18柱層析連續純化，先經1000ml 10%乙醇水溶液洗脫，后用500ml 80%乙醇水溶液洗脫，80%乙醇水洗脫液經45℃旋轉蒸發，放入-20℃冰箱保存2h，再在-80℃冰箱保存4h后進行冷凍干燥，得到紫背菜花青素。