[發明專利]一種用于培養人臍帶間充質干細胞的預處理裝置及其相關應用

有效

• 申請號: 201710878240.5
• 申請日: 2017-09-26
• 公開（公告）號: CN107475111B
• 公開（公告）日: 2020-07-14
• 發明（設計）人: 王曉冰
• 申請（專利權）人: 上海萊威生物科技有限公司
• 主分類號: C12M1/40
• 分類號: C12M1/40;C12M1/00;C12N5/0775
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種用于培養人臍帶間充質干細胞的預處理裝置及其相應關用，該預處理裝置包括：一可翻轉的上蓋，上蓋上設置有刀槽；位于殼體開口處的切割組件，切割組件由網格狀刀片和彈性密封圈組成，網格狀刀片與刀槽相對應設置；位于殼體中部的消化組件；以及位于殼體下部的清洗離心組件。還提供一種基于該預處理裝置的細胞預處理以及培養方法，其由人臍帶切碎分離、酶消化、離心純化、培養基配制、二維培養、傳代培養等六步過程組成。基于本發明預處理裝置的細胞培養方法，技術穩定，重復性好，避免了細胞活性低、得率差的問題，極大地提高細胞活性和得率，且簡化了操作過程，使用靈活方便。

技術領域

本發明屬于人的細胞培養技術領域，具體涉及一種用于培養人臍帶間充質干細胞的預處理裝置及其相應關用。

背景技術

間充質干細胞是一類很有特性的成體干細胞。這種細胞具有分化成各種成熟細胞的潛能，包括：脂肪細胞、軟骨細胞、骨細胞、肌腱細胞和肌細胞。這些特性以及它們的發育可塑性引起了科研界的廣泛關注，因為其可被用于再生醫學研究。在體外，從臍帶華通氏膠分離出的間充質干細胞，經過神經定向誘導培養基、Shh和FGF8的誘導，可以分化成神經元和神經膠質細胞。間充質干細胞還可以被分化為成脂肪細胞和成骨細胞。另外，在心肌誘導培養基中，間充質干細胞可以被分化為心肌細胞。人臍帶間充質干細胞表達基質受體CD44和CD105以及間充質干細胞標志物SH2和SH3，但不表達造血細胞系標志物CD34。

目前，國內外已經有大量的研究人員進行了人臍帶間充質干細胞的培養和藥理學特性方面的研究，既往的研究多采用組織塊培養法或者胰酶消化法。其缺點在于組織塊培養方法的原代細胞培養時間長，且并非每一塊都有細胞爬出，故細胞傳代次數和最終獲取的細胞數較少，細胞種類不純，使進一步持續深入的研究受到限制。而胰酶消化法對細胞的損害比較大，尤其是在37度水浴的條件下，胰酶可以最大程度地發揮其消化效力，故對消化時間和消化次數的掌控較難。過度消化會導致細胞損傷，細胞膜破損，DNA溢出。所以，以往的研究人員會發現，消化之后的單細胞懸液非常粘稠，有時需要在消化液中加入DNA酶來打斷溢出的DNA。這樣導致的結果往往是，細胞數量非常少、得率低且活力差。近年來，尤其是近兩年以來，將人臍帶間充質干細胞作為生物藥品管理的趨勢越來越明顯，但由于缺乏規范且有效的分離方案，使得生產臍帶干細胞的效率無法量產達到臨床應用的需求。

此外，傳統臍帶干細胞的培養，一般先對人臍帶組織進行前處理獲得較為純凈的人臍帶間充質干細胞后，再采用培養皿進行培養。而對人臍帶組織進行前處理時，人臍帶組織需要在不同的處理設備或容器中進行預處理，人臍帶組織在這種空間大轉移過沖中很容易受到空氣中的細菌病毒等微生物的污染，因此，目前人臍帶間充質干細胞培養在這種開放式的前處理方式下手續繁瑣、效率低下，人力物力消耗較大，成才較高，無法大規模的推廣應用。

發明內容

本發明為解決現有技術中所存在的上述問題，提出的一種用于培養人臍帶間充質干細胞的預處理裝置及其相關應用。

與傳統培養法相比，基于本發明預處理裝置的培養人臍帶間充質干細胞的方法，使人臍帶間充質干細胞的培養簡單易行，培養獲得的人臍帶間充質干細胞較純，生長良好，細胞增殖快，可多次傳代，且細胞得率和存活率均大大提高。一根臍帶大約可以分離擴增出100億個干細胞，為臍帶干細胞成為生物藥品進行大量庫存提供了可能。

為實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

本發明的第一個方面是提供一種人臍帶間充質干細胞的預處理裝置，具體包括：

一可翻轉的上蓋，所述上蓋上設置有刀槽，所述刀槽由至少兩組不同深度且相互的網格狀的子刀槽組成；

與所述上蓋鉸鏈連接的殼體；