[發明專利]一種水稻紋枯病的微生物防控技術

在審

• 申請號: 201710873034.5
• 申請日: 2017-09-25
• 公開（公告）號: CN107624794A
• 公開（公告）日: 2018-01-26
• 發明（設計）人: 章云;張貝尼
• 申請（專利權）人: 安徽省中日農業環保科技有限公司
• 主分類號: A01N63/02
• 分類號: A01N63/02;A01N43/16;A01P3/00;A01P21/00
• 代理公司: 北京元本知識產權代理事務所11308
• 代理人: 范奇

1.一種水稻紋枯病的微生物防控技術，其特征在于，包括以下步驟：

步驟一：制備NA固體培養基，采用蛋白胨10.0g、牛肉粉3.0g、氯化鈉5.0g、瓊脂15.0g、葡萄糖2.5g，加蒸餾水溶解，定容至1L，PH調至7±0.1，分裝后121℃滅菌20min；

步驟二：制備LB液體培養液，在950ml去離子水中加入胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、NaCl10g，攪拌直至溶質溶解，用5mol/LNaOH調pH至7.0，用去離子水定容至1L，在15psi高壓下蒸汽滅菌21min；

步驟三：將拮抗細菌在NA固體培養基上于37℃活化24h，用無菌水制成菌體懸浮液，取10mL菌體懸浮液接種到裝有100mLLB液體培養液的250mL錐形瓶中，在28℃的恒溫條件下以220r/min的速率震蕩培養48h，得到種子液；

步驟四：種子液以10％的接種量接入裝有300mLLB液體培養液的1000mL錐形瓶中，磁力攪拌，轉速為1000r/min，置于28℃的振蕩培養箱中連續培養84h，得發酵液；

步驟五：將發酵液和乙酸乙酯以質量比1:2充分混勻萃取48h，取萃取液于40℃旋轉蒸發儀中，以110r/min的轉速旋轉蒸發至膏狀，用無菌水溶解，配成質量濃度為1000mg/L的發酵液提取物，置于4℃冰箱保存備用；

步驟六：在無菌條件下，將發酵液提取物和質量濃度500mg/L的井岡霉素按質量比4:1混合均勻得混配劑；

步驟七：水稻種子用質量濃度15％的H₂O₂消毒20min，浸種48h，期間用蒸餾水換水2-3次，芽露白后在30℃下光照培養4-5d，然后選取生長一致的幼苗移栽于田地，在幼苗生長的第10、20、50和80天向水稻葉面噴灑混配劑，并在幼苗長到第20天時進行加硅處理，即在Hoagland營養液中加入2.0mmol·L^-1K₂SO₃溶液，并用2mol·L^-1HCl調節pH至5.6，噴灑于水稻葉面。

2.根據權利要求1所述的一種水稻紋枯病的微生物防控技術，其特征在于：所述的拮抗細菌為拮抗細菌SU8。

3.根據權利要求1所述的一種水稻紋枯病的微生物防控技術，其特征在于：所述的拮抗細菌SU8為銅綠假單胞菌。