[發明專利]用于快速鑒別卡他莫拉菌的顯色培養基

有效

• 申請號: 201710872979.5
• 申請日: 2017-09-25
• 公開（公告）號: CN107365828B
• 公開（公告）日: 2020-12-01
• 發明（設計）人: 崔柳青;景紅娟;周廣舟;王寧;張璐;王雪琴
• 申請（專利權）人: 河南工業大學
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04
• 代理公司: 鄭州異開專利事務所(普通合伙) 41114
• 代理人: 韓華

本發明公開了一種用于快速鑒別卡他莫拉菌的顯色培養基，包括基礎培養基，在所述基礎培養基中還添加有1?20克/升D?葡萄糖，5?50毫克/升溴甲酚紫，50?500毫克/升顯色底物，1?20毫克/升氯化高鐵血紅素和適量的復合抑菌劑，其pH值為7.2?7.5。本發明的優點在于在傳統使用的基礎培養基中準確添加了一定量的顯色底物和氯化血紅素，從而使得鑒別方法簡單，操作時無需特殊設備，也不需要額外的細菌分離培養，分離鑒別同時進行，時間短且操作簡單，直接使用標本就能快速分離鑒別出卡他莫拉菌，其靈敏度可達到94.5%，特異性達到95.1%，滿足了臨床檢測并鑒別卡他莫拉菌的需求。

技術領域

本發明涉及生物檢測用的培養基，尤其是涉及一種用于快速鑒別卡他莫拉菌的顯色培養基。

背景技術

卡他莫拉菌（Moraxella catarrhalis），以前曾稱為卡他微球菌（Micrococuus

catarrhalis）、卡他奈瑟氏菌（Neisseria catarrhalis），是一種革蘭氏陰性雙球菌，可引起中耳炎、結膜炎、鼻竇炎、肺炎、支氣管炎、菌血癥和泌尿系統感染等，老年人和免疫力低下的人群易感。國外資料顯示，卡他莫拉菌在成人下呼吸道感染及兒童肺炎、中耳炎等標本中的分離率，僅次于流感嗜血桿菌和肺炎鏈球菌，列第3位，卡他莫拉菌產生β-內酰胺酶的菌株漸多，為臨床治療帶來一定困難。因此快速準確地檢測并鑒別卡他莫拉菌，具有比較大的臨床實際意義。

卡他莫拉菌現有檢測鑒別技術基本有以下三種：

1、手工鑒定技術 先用普通肉湯培養基平板或血瓊脂培養基平板或巧克力瓊脂培養基平板等進行分離培養。如用血瓊脂培養基平板，35℃培養18-24小時，卡他莫拉菌會長成光滑、不透明、凸起、灰白色或白色菌落，挑取這類疑似菌落進行一系列試驗進行鑒別驗證：如用接種環推菌落看能否推動，糖發酵是否陰性，是否產硫化氫、是否形成吲哚，是否還原硝酸鹽和亞硝酸鹽，氧化酶和觸酶是否陽性，DNA酶是否陽性，是否水解三丁腈。由于手工鑒定方法不但時間長（需要兩天），而且操作極為復雜，實驗室少量試劑的配制會浪費大量的試劑，直接采購成套鑒定試劑價格比較高并且質量差異比較大，結果難以保障。

2、自動化生化細菌鑒定技術 鑒定需要24小時，同樣不能從標本直接鑒別卡他莫拉菌，只能對分離出的純菌進行鑒別，而需要用平板培養基先進行分離培養，因此該技術鑒別卡他莫拉菌也需要兩天。另外該技術用的自動化細菌鑒定儀較昂貴，而且鑒定所需的鑒定卡也比較貴。

3、Maldi-Tof MS（基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜）技術 此方法鑒別所需時間短，幾分鐘就可出結果，但并不能從標本直接鑒別卡他莫拉菌，而需要用平板培養基先進行分離培養，且只能對分離出的純菌進行鑒別，而平板培養基的分離培養至少需要1天。因此雖然鑒別時間短，但所需時間并不短，而且Maldi-Tof MS儀器設備十分昂貴，臨床實驗室裝備還處于培養導入期。

顯色培養基是上個世紀末期逐漸興起的一種細菌快檢技術，是利用細菌具有的特異性，通過選擇性培養的方法結合特異性酶底物，讓目的細菌生長并呈現與其它生長出的細菌菌落明顯不同的顏色或其他菌落特征，從而鑒別目的菌。顯色培養最大的優點是直接使用標本，把細菌的分離培養與鑒別結合到一起，達到在分離的同時直接鑒別的效果。到目前為止，顯色培養已經有多種，比如念珠菌顯色培養基、B群鏈球菌顯色培養基、金黃色葡萄球菌顯色培養基等等，但尚未發現有卡他莫拉菌顯色培養基問世。

發明內容

本發明的目的在于提供一種直接使用標本就能快速鑒別卡他莫拉菌的顯色培養基。

為實現上述目的，本發明可采取下述技術方案：