[發(fā)明專利]與谷子穎殼顏色性狀緊密連鎖的分子標(biāo)記、引物及應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710863719.1
• 申請(qǐng)日: 2017-09-22
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107385105B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-03-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王軍;王智蘭;鄒洪鋒;杜國(guó)華;杜曉芬;楊慧卿;郭二虎;袁國(guó)保;韓芳;袁峰;張林義;彭書(shū)忠
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院谷子研究所;深圳華大小米產(chǎn)業(yè)股份有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/6895
• 分類號(hào): C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 西安銘澤知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 61223
• 代理人: 李振瑞

1.一種與谷子穎殼顏色性狀緊密連鎖的分子標(biāo)記，其特征在于，所述分子標(biāo)記為MRI325，MRI325的核苷酸序列如SEQ ID NO. 1或者SEQ ID NO. 2所示，位于谷子第7條染色體17265937bp至17288536bp區(qū)間內(nèi)。

2.一種獲得權(quán)利要求1所述的與谷子穎殼顏色性狀緊密連鎖的分子標(biāo)記的引物，其特征在于，所述引物為MRI325F和MRI325R，其中引物序列如下：

MRI325F：5’- ACCCTGGTAAACTCATGCCT-3’，

MRI325R：5’- TGGGTTTGGAGCATCAGGAT-3’。

3.一種應(yīng)用權(quán)利要求2所述的引物鑒定谷子穎殼顏色的方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1，提取待檢測(cè)谷子材料的基因組DNA，谷子材料品種為晉谷21或者矮寧黃；

S2，PCR擴(kuò)增：

a. 反應(yīng)體系：10μL體系，各組分物質(zhì)的含量分別為:1μL基因組DNA、0.5μL上游引物、0.5μL下游引物、1μL10×Buffer、0.8μLdNTPs、0.1μLTaq酶、ddH₂O 6.1μL，混勻；

其中，上游引物為權(quán)利要求2所述MRI325F、下游引物為權(quán)利要求2所述MRI325R；

b. PCR反應(yīng)程序：

94℃預(yù)變性5min；94℃變性30s，60℃退火30s，72℃延伸40s，運(yùn)行35個(gè)循環(huán)；最后72℃延伸10min；

S3，電泳：

擴(kuò)增后的產(chǎn)物進(jìn)行8%聚丙烯酰胺凝膠電泳，120V電壓，電泳1.5h；

S4，結(jié)果判定：

如果擴(kuò)增后的產(chǎn)物片段大小為151bp，則待測(cè)谷子材料的谷子穎殼顏色為黃色，如果擴(kuò)增后的產(chǎn)物片段大小為189bp，則待測(cè)谷子材料的谷子穎殼顏色為白色。

4.一種權(quán)利要求2所述的與谷子穎殼顏色性狀緊密連鎖的分子標(biāo)記的引物在谷子穎殼顏色早期鑒定中的應(yīng)用，其特征在于，所述谷子品種為晉谷21或者矮寧黃。

5.一種權(quán)利要求3所述的鑒定谷子穎殼顏色的方法在谷子穎殼顏色早期鑒定中的應(yīng)用，其特征在于，所述谷子品種為晉谷21或者矮寧黃。