[發明專利]一種ACAT1基因干擾的嵌合抗原受體T細胞

有效

• 申請號: 201710861975.7
• 申請日: 2017-09-21
• 公開（公告）號: CN109321587B
• 公開（公告）日: 2022-06-28
• 發明（設計）人: 江文正;蘇瓊;胡雪菲;何聰
• 申請（專利權）人: 華東師范大學;上海邦耀生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/62
• 分類號: C12N15/62;C12N15/861;C12N15/867;C12N5/10;A61P35/00;C12N15/113
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 肖艷;崔佳佳

1.一種核酸構建物，其特征在于，所述核酸構建物的結構如下式A或式B所示：

B1-Z-B2 A

B2-Z-B1 B

式中，

各“-”獨立地為鍵或核苷酸連接序列；

B1為第一表達盒，所述的第一表達盒用于表達抑制ACAT1基因表達的干擾RNA；

B2為第二表達盒，所述的第二表達盒用于表達嵌合抗原受體；

Z為任選的間隔序列，所述干擾RNA針對的靶序列如SEQ ID NO.: 1所示，所述的干擾RNA的序列如SEQ ID NO.: 2和3所示。

2.如權利要求1所述的核酸構建物，其特征在于，所述嵌合抗原受體的結構如下式C所示：

L－scFv－H－TM－C－CD3ζ C

式中，

各“－”獨立地為連接肽或肽鍵

L為任選的信號肽序列；

scFv為抗原結合結構域；

H為絞鏈區；

TM為跨膜結構域；

C為共刺激信號受體酪氨酸激活基序；

CD3ζ為源于CD3ζ的胞漿信號傳導序列。

3.如權利要求2所述的核酸構建物，其特征在于，所述的L為選自下組的蛋白的信號肽：CD8、GM-CSF、CD4、CD137、或其組合。

4.如權利要求2所述的核酸構建物，其特征在于，所述scFv為靶向選自下組抗原的抗體單鏈可變區序列：CD19、CD20、CD22、CD123、CD47、CD138、CD33、CD30、mesothelin、EGFR、GPC3、BCMA、ErbB2、NKG2D ligands、LMP1、EpCAM、VEGFR-1、Lewis-Y、ROR1、Claudin18.2、或其組合。

5.如權利要求4所述的核酸構建物，其特征在于，scFv為靶向CD19的抗原結合結構域。

6.如權利要求2所述的核酸構建物，其特征在于，所述的嵌合抗原受體的序列如SEQ IDNO.: 12所示。

7.一種載體，其特征在于，所述的載體含有權利要求1所述的核酸構建物。

8.一種宿主細胞，其特征在于，所述的宿主細胞中含有權利要求7所述的所述的載體或染色體中整合有外源的權利要求1所述的核酸構建物，所述細胞為T細胞。

9.一種細胞制劑，其特征在于，所述細胞制劑含有嵌合抗原受體細胞，所述的嵌合抗原受體細胞含有權利要求7所述的所述的載體或染色體中整合有外源的權利要求1所述的核酸構建物。

10.如權利要求9所述的細胞制劑，其特征在于，所述的嵌合抗原受體細胞的ACAT1基因表達受抑制。

11.一種藥物組合物，其特征在于，所述組合物含有藥學上可接受的載體以及權利要求1所述的核酸構建物、權利要求7所述的載體、或權利要求8所述的細胞。

12.一種權利要求1所述的核酸構建物、權利要求7所述的載體、權利要求8所述的細胞、或權利要求9所述的細胞制劑、或權利要求11所述的藥物組合物的用途，其特征在于，用于制備抑制腫瘤細胞的藥物或制劑。