[發明專利]一種核酸納米結構及其制備方法和應用有效
| 申請號： | 201710859574.8 | 申請日： | 2017-09-21 |
| 公開（公告）號： | CN107488661B | 公開（公告）日： | 2020-12-15 |
| 發明（設計）人： | 丁寶全;湛鵬飛;李娜;王振剛;蔣喬;王婷 | 申請（專利權）人： | 國家納米科學中心 |
| 主分類號： | C12N15/11 | 分類號： | C12N15/11;C12N15/10;B82Y5/00;B82Y40/00;G01N21/65;B22F9/24;B22F1/00 |
| 代理公司： | 北京品源專利代理有限公司 11332 | 代理人： | 鞏克棟 |
| 地址： | 100190 北*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 核酸 納米 結構 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種金蝴蝶結結構，其特征在于，所述金蝴蝶結結構包括貴金屬納米結構和核酸納米結構，所述貴金屬納米結構表面修飾有寡核苷酸序列，所述貴金屬納米結構與所述核酸納米結構通過寡核苷酸序列進行組裝；
所述核酸納米結構為通過DNA折紙技術構建的六個三角形DNA折紙結構組裝形成的六邊形DNA納米結構，其是通過腳手架鏈與訂書釘鏈和捕獲鏈進行雜交，再通過連接鏈分別與六個三角形DNA折紙結構的腳手架鏈雜交而自組裝形成的六邊形DNA納米結構；
所述貴金屬納米結構為表面酸性修飾有巰基化DNA序列的金棱柱，所述巰基化DNA序列與所述捕獲鏈互補；
所述金棱柱為金三棱柱。
2.根據權利要求1所述的金蝴蝶結結構，其特征在于，所述核酸納米結構的邊長為100-150nm。
3.根據權利要求2所述的金蝴蝶結結構，其特征在于，所述核酸納米結構的邊長為120nm。
4.根據權利要求1所述的金蝴蝶結結構，其特征在于，所述腳手架鏈與所述訂書釘鏈、所述腳手架鏈與所述捕獲鏈、所述腳手架鏈與所述連接鏈通過堿基互補配對原則進行雜交。
5.根據權利要求1所述的金蝴蝶結結構，其特征在于，所述腳手架鏈為M13噬菌體基因組DNA。
6.根據權利要求1所述的金蝴蝶結結構，其特征在于，所述訂書釘鏈為人工合成的寡核苷酸序列。
7.根據權利要求1所述的金蝴蝶結結構，其特征在于，所述捕獲鏈為人工合成的寡核苷酸序列。
8.根據權利要求1所述的金蝴蝶結結構，其特征在于，所述連接鏈包含二硫鍵和/或限制性內切酶的特異性識別位點。
9.根據權利要求1-8中任一項所述的金蝴蝶結結構，其特征在于，所述核酸納米結構的制備方法包括以下步驟：
(1)將所述腳手架鏈溶液與所述訂書釘鏈、捕獲鏈和連接鏈的混合溶液按照摩爾比為1:(1-20)混合均勻；
(2)以85-98℃為起始溫度退火至15-30℃，采用離心柱離心去除過量的訂書釘鏈和捕獲鏈；
(3)將純化后的六種三角形DNA折紙結構等量混合后，以40-50℃為起始溫度退火至20-30℃，進行梯度PCR循環，制得所述核酸納米結構。
10.根據權利要求9所述的金蝴蝶結結構，其特征在于，步驟(1)所述腳手架鏈溶液與所述訂書釘鏈、捕獲鏈和連接鏈的混合溶液的摩爾比為1:(1-10)。
11.根據權利要求9所述的金蝴蝶結結構，其特征在于，步驟(1)所述腳手架鏈溶液與所述訂書釘鏈、捕獲鏈和連接鏈的混合溶液的摩爾比為1:2。
12.根據權利要求9所述的金蝴蝶結結構，其特征在于，步驟(2)所述退火的起始溫度為90-98℃。
13.根據權利要求9所述的金蝴蝶結結構，其特征在于，步驟(2)所述退火的起始溫度為95℃。
14.根據權利要求9所述的金蝴蝶結結構，其特征在于，步驟(2)所述退火的終點溫度為15-25℃。
15.根據權利要求9所述的金蝴蝶結結構，其特征在于，步驟(2)所述退火的終點溫度為20℃。
16.根據權利要求9所述的金蝴蝶結結構，其特征在于，步驟(2)所述退火的持續時間為5-20h。
17.根據權利要求9所述的金蝴蝶結結構，其特征在于，步驟(2)所述退火的持續時間為8-15h。
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