[發(fā)明專利]基于免疫磁珠標記的細胞篩選方法及系統(tǒng)有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710858509.3 | 申請日: | 2017-09-21 |
| 公開(公告)號: | CN109536434B | 公開(公告)日: | 2022-04-29 |
| 發(fā)明(設計)人: | 溫良恭;李智 | 申請(專利權)人: | 北京航空航天大學青島研究院 |
| 主分類號: | C12N5/00 | 分類號: | C12N5/00;C12N13/00;C12M1/00;C12M1/42 |
| 代理公司: | 青島中天匯智知識產權代理有限公司 37241 | 代理人: | 史文樊;雷斐 |
| 地址: | 266000 山*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 基于 免疫 標記 細胞 篩選 方法 系統(tǒng) | ||
1.基于免疫磁珠標記的微量細胞篩選方法,其特征在于,所述篩選方法,包括如下步驟,
S1.將包含有游離的免疫磁珠、被免疫磁珠標記的目標細胞和其他細胞的樣品輸入到細胞篩選裝置的下層腔體中;所述細胞篩選裝置的主體結構被一層細胞篩分割成上層、下層腔體,所述細胞篩的網孔形狀狹縫型,細胞篩選裝置的左側,對應下層腔體設置有進樣口;細胞篩選裝置的右側,對應上層腔體和下層腔體分別設置有上層出樣口和下層出樣口;所述腔體中充滿了細胞緩沖液;
S2.游離的免疫磁珠直徑遠小于細胞篩的網孔尺寸,而被免疫磁珠標記的目標細胞直徑大于細胞篩的網孔,對細胞篩選裝置施加縱向磁場和橫向振蕩,將免疫磁珠吸入上層腔體,目標細胞吸附在細胞篩的下表面;
S3.分別沖洗得到包含游離的免疫磁珠的溶液、包含其他細胞的溶液和包含被免疫磁珠標記的目標細胞的溶液;
步驟S3的具體操作步驟為:
(1)撤銷縱向磁場和橫向振蕩,對上層腔體進行沖洗,得到包含游離的免疫磁珠的溶液;
(2)施加縱向磁場,對下層腔體進行沖洗,得到包含其他細胞的溶液;
(3)撤銷縱向磁場,對下層腔體進行沖洗,得到包含被免疫磁珠標記的目標細胞的溶液;
或者,步驟S3的具體操作步驟為:
(1)撤銷橫向振蕩,對下層腔體進行沖洗,得到包含其他細胞的溶液;
(2)撤銷縱向磁場,對上層腔體進行沖洗,得到包含游離的免疫磁珠的溶液,對下層腔體進行沖洗,得到包含被免疫磁珠標記的目標細胞的溶液。
2.根據權利要求1所述的基于免疫磁珠標記的微量細胞篩選方法,其特征在于:所述縱向磁場由永磁體、軟磁體或者電磁體產生。
3.根據權利要求1或2所述的基于免疫磁珠標記的微量細胞篩選方法,其特征在于:所述橫向振蕩包括橫向振蕩磁場和/或橫向振蕩波和/或橫向交變水流。
4.根據權利要求3所述的基于免疫磁珠標記的微量細胞篩選方法,其特征在于:所述橫向振蕩磁場由電磁體產生;所述橫向振蕩波為橫向振蕩微波或者橫向振蕩電磁波。
5.根據權利要求1或2所述的基于免疫磁珠標記的微量細胞篩選方法,其特征在于:樣品輸入以及沖洗的操作是通過注射泵或者微流泵來實現的。
6.基于免疫磁珠標記的微量細胞篩選系統(tǒng),其特征在于:包括細胞篩選裝置(1)、永磁鐵(2)、電磁鐵(3)和注射泵(4),
所述細胞篩選裝置(1)包括內部中空的長方體狀殼體(15),殼體(15)內部水平設置一層細胞篩(11),將殼體(15)分割成上層腔體和下層腔體;對應下層腔體,殼體(15)的左側設置有進樣口(12),右側設置有下層出樣口(13);對應上層腔體,殼體(15)的右側設置有上層出樣口(14);
所述電磁鐵(3)包括兩個通電線圈(31),分別設置在細胞篩選裝置(1)的左右兩側,永磁鐵(2)設置在細胞篩選裝置(1)的上側;
所述注射泵(4)的連接端口分別與下層出樣口(13)和上層出樣口(14)相連通。
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