[發(fā)明專利]一種使用超臨界流體色譜制備膽固醇的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710855976.0
• 申請(qǐng)日: 2017-09-21
• 公開（公告）號(hào): CN109535215A
• 公開（公告）日: 2019-03-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳海;尤慧艷;趙建強(qiáng)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇漢邦科技有限公司
• 主分類號(hào): C07J9/00
• 分類號(hào): C07J9/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明公開了一種使用超臨界流體制備膽固醇的方法，以裸硅膠、C18、C8或氨基作為固定相，超臨界CO₂做流動(dòng)相，使用甲醇、乙醇和異丙醇做夾帶劑，分離純化得到純度95%以上的膽固醇，本發(fā)明使用CO₂做流動(dòng)相，僅添加少量有機(jī)溶劑，減少了有機(jī)溶劑對(duì)環(huán)境的污染，綠色環(huán)保，同時(shí)，制備過程簡單，易于操作。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物的純化領(lǐng)域，具體涉及一種使用超臨界流體色譜制備膽固醇的方法。

背景技術(shù)

膽固醇，英文名稱為 Cholesterol，膽固醇在血液中存在于脂蛋白中，其存在形式包括高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、極低密度脂蛋白膽固醇幾種。在血中存在的膽固醇絕大多數(shù)都是和脂肪酸結(jié)合的膽固醇酯，僅有10%不到的膽固醇是以游離態(tài)存在的。高密度脂蛋白有助于清除細(xì)胞中的膽固醇，而低密度脂蛋白超標(biāo)一般被認(rèn)為是心血管疾病的前兆，血液中膽固醇含量每單位在140~199毫克之間，是比較正常的膽固醇水平。

超臨界CO₂流體萃取（SFE）分離過程的原理是利用超臨界流體的溶解能力與其密度的關(guān)系，即利用壓力和溫度對(duì)超臨界流體溶解能力的影響而進(jìn)行的。在超臨界狀態(tài)下，將超臨界流體與待分離的物質(zhì)接觸，使其有選擇性地把極性大小、沸點(diǎn)高低和分子量大小的成分依次萃取出來。當(dāng)然，對(duì)應(yīng)各壓力范圍所得到的萃取物不可能是單一的，但可以控制條件得到最佳比例的混合成分，然后借助減壓、升溫的方法使超臨界流體變成普通氣體，被萃取物質(zhì)則完全或基本析出，從而達(dá)到分離提純的目的，所以超臨界CO₂流體萃取過程是由萃取和分離過程組合而成的。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種分離純化膽固醇的方法，以得到一種高純度的膽固醇，具體方案如下：以裸硅膠、C18、C8或氨基作為固定相，超臨界CO₂做流動(dòng)相，甲醇、乙醇和異丙醇為夾帶劑，分離純化得到純度95%以上的膽固醇。包括以下步驟：

A．使用三氯甲烷溶解薄荷腦粗品，0.45um的微孔濾膜過濾；

B． 配置夾帶劑，具體為甲醇：乙醇：異丙醇=1:4:3；

C．使用含低比例夾帶劑的流動(dòng)相體系平衡系統(tǒng)15min，進(jìn)樣，洗脫70min后開始接收目標(biāo)組分，接收約10min后使用含高比例的夾帶劑進(jìn)行洗脫；

D. 將收集到的液體餾分使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行后處理，得到的白色粉末即為目標(biāo)產(chǎn)物。

優(yōu)選地，步驟C中的，洗脫固定相為裸硅膠、C18硅膠、C8硅膠或氨基類硅膠。

優(yōu)選地，步驟C中的低比例夾帶劑中CO₂：夾帶劑比例為90：10~98：2。

本發(fā)明具有以下技術(shù)優(yōu)勢(shì)：使用超臨界流體色譜純化得到純度大于95%的膽固醇，使用CO₂做流動(dòng)相，僅添加少量有機(jī)溶劑，減少了有機(jī)溶劑對(duì)環(huán)境的污染，綠色環(huán)保，同時(shí)，制備過程簡單，易于操作。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

使用三氯甲烷溶解膽固醇粗品，然后使用0.45um的微孔濾膜進(jìn)行過濾，配置甲醇：乙醇：異丙醇=1:4:3的夾帶劑，裸硅膠作為固定相，使用超臨界CO₂：夾帶劑=90:10的流動(dòng)相體系平衡系統(tǒng)15min，進(jìn)樣，洗脫約70min后開始接收目標(biāo)組分，接收約10min，然后使用高比例的夾帶劑進(jìn)行洗脫。將接收的液體流份使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行后處理，得到的白色粉末即為目標(biāo)產(chǎn)物。

實(shí)施例2