[發明專利]小分子多肽及其應用

有效

• 申請號: 201710855117.1
• 申請日: 2017-09-20
• 公開（公告）號: CN107365363B
• 公開（公告）日: 2020-08-04
• 發明（設計）人: 衛林;徐薇
• 申請（專利權）人: 蘇州大學
• 主分類號: C07K14/01
• 分類號: C07K14/01;A61K38/16;A61P31/06
• 代理公司: 蘇州市中南偉業知識產權代理事務所(普通合伙) 32257
• 代理人: 楊慧林

本發明涉及一種小分子多肽，其成熟肽的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本發明還公開了上述小分子多肽作為抗結核桿菌藥物中的應用。本發明中的分枝桿菌噬菌體來源的抗結核桿菌小分子多肽具有分子量小，合成成本低，抗結核桿菌H37Rv的效果明顯，對利福平耐藥的H37Rv也具有殺滅作用，且對其他正常的革蘭氏陽性菌、陰性菌和真菌沒有影響，在制備抗結核藥物中具有較好的應用前景。

技術領域

本發明涉及生物醫學領域，尤其涉及一種小分子多肽及其應用。

背景技術

結核病被列為全世界重大傳染病之一。結核桿菌是引起該病的病原菌，可感染全身器官，但以肺結核最為常見，是一種嚴重的呼吸道傳染疾病。由于常規BCG疫苗對肺結核預防的無效性，結核耐藥菌株的出現以及HIV感染導致的結核合并感染，肺結核的發病及死亡目前居高不下，形勢十分嚴重。全球有1/3的人口感染結核桿菌，大約有10％感染者表現出臨床癥狀。每年都會有900萬新增結核桿菌感染病例，有200萬人死于結核病。結核病仍然是當今威脅人類健康的一個主要的傳染病殺手。

目前世界衛生組織提倡使用的一線抗結核藥有異煙肼、利福平、吡嗪酰胺、鏈霉素、乙胺丁醇和氨硫脲等。這些藥物雖然十分有效，但是由于近年抗結核藥物的不規范使用導致耐藥性結核菌株的變異和流行，出現了嚴重的結核桿菌耐藥性問題。異煙肼主要通過抑制菌體細胞壁分枝菌酸的合成，致細胞壁缺損而死亡；利福平則與依賴DNA的RNA多聚酶的β亞單位牢固結合，防止該酶與DNA連接，抑制細菌RNA的合成，從而阻斷RNA轉錄過程，致使DNA和蛋白的合成停止而死亡。兩者的抗菌機理均抑制結核桿菌代謝過程中關鍵細胞結構組分的合成，這類抗菌機理極易誘發微生物的耐藥性。在過去的幾十年里，對付耐藥性結核病的進展非常緩慢，全球范圍內每五名耐藥性患者中只有一人可以被準確診斷出來。耐藥結核菌株的出現，使病程延長，死亡危險性上升，還可能會導致長期傳染性，擴大耐藥性傳播的機會，增加治療費用。隨著耐藥結核菌株的快速增長和缺乏有效的新的抗結核藥，亟待研發具有獨特殺菌機制的生物類抗結核藥物。

抗菌肽的獨特抗菌機理，使其成為當前世界上新型抗感染藥物研發的熱點。抗菌肽主要是通過其兩親性的螺旋結構和凈正電荷相互作用直接結合在微生物細胞膜表面，改變微生物細胞膜的通透性，導致微生物細胞滲透壓發生改變，形成穿孔而導致細胞質外流。該殺菌機理不同于傳統抗生素通過抑制微生物代謝、蛋白質合成等方式，因此其殺菌速度快(目前已報道的抗菌肽中有的可以在不到一分鐘內發揮殺菌效果，而作為陽性對照的抗生素需要至少3小時)，較短的殺菌時間很難導致微生物耐藥。抗生素誘發微生物釋放內毒素從而導致膿毒癥的產生，而抗菌肽不僅不誘發內毒素的釋放，還可中和內毒素，不誘發膿毒癥。因此，以抗菌肽抑制結核分枝桿菌具備殺菌直接、速度快、不易誘導耐藥性的良好特性。

噬菌體(Bacteriophage)作為一種專性寄生于細菌的病毒，已經進化出一種可以與宿主細菌相互作用的獨特機制，富含著豐富的生物活性物質，包括許多活性多肽和蛋白，是篩選抗結核桿菌多肽的良好資源庫。目前已經有報道來源于噬菌體基因編碼的多肽和蛋白，能夠快速殺死細菌。還有一些噬菌體來源的多肽和蛋白能夠靶向作用于細菌的代謝過程，抑制細菌生長的作用。我國研究人員對26種銅綠假單胞桿菌噬菌體的基因組進行測序，鑒定出了31個多肽，這些多肽可以靶向作用于DNA的復制與RNA的轉錄，從而抑制細菌的生長與增殖。目前需要尋找多種作用于結核桿菌的多肽與蛋白，特別是發現一些有效的小分子多肽，為研發新型生物類抗結核(輔助)藥物提供優秀模板分子，同時降低多肽藥物研發的成本。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明的目的是提供一種小分子多肽及其應用，該小分子多肽分子量小，合成成本低，抗結核桿菌效果明顯，對其他細菌和真菌沒有影響，在制備抗結核藥物中具有較好的應用前景。

本發明的一種小分子多肽，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。其分子量為1827.25Da，等電點為12.03。將其命名為AK15。

進一步地，序列中的氨基酸均為L-型。