[發明專利]一種骨肽提取方法

在審

• 申請號: 201710848556.X
• 申請日: 2017-09-19
• 公開（公告）號: CN107418992A
• 公開（公告）日: 2017-12-01
• 發明（設計）人: 王峰云;潘慶;蘇燕玲
• 申請（專利權）人: 廣東雅道生物科技有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06
• 代理公司: 北京精金石專利代理事務所(普通合伙)11470
• 代理人: 黃福偉

1.一種骨肽提取方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟1：將動物骨頭去除骨膜后碾碎，取出骨髓；

步驟2：將骨髓分散到6-8倍骨髓重量的水中在36℃-38℃的恒溫水浴中通過超聲處理使骨髓細胞破裂，超聲頻率為250-300KHz；

步驟3：將步驟2處理得到的混合物進行微波加熱處理，微波加熱處理時間為4-5min，微波頻率為2300-2400MHz；混合物加熱后的溫度為75-80℃；

步驟4：將步驟3處理得到的混合物冷卻至室溫后加入霉菌蛋白酶、桿菌蛋白酶復合酶水解3-6h，水解溫度為45-47℃，水解結束后對蛋白酶高溫滅活；霉菌蛋白酶的用量為2000U/g骨髓，桿菌蛋白酶的用量為4000U/g骨髓；

步驟5：將步驟4得到的混合物通過降溫、離心后得到上清液；

步驟6：將上清液經過后處理得到骨肽。

2.根據權利要求1所述的骨肽提取方法，其特征在于，步驟1中還包括對取出的骨髓通過有機溶劑萃取分離油脂。

3.根據權利要求1所述的骨肽提取方法，其特征在于，所述的萃取溶劑為正己烷、異丙醇、石油醚、DMSO中之一或任意兩種組合。

4.根據權利要求1所述的骨肽提取方法，其特征在于，步驟4中，水解前調節混合物的pH值為7.5-8。

5.根據權利要求4所述的骨肽提取方法，其特征在于，調節pH值所用的酸為有機酸，所述的有機酸為草酸、檸檬酸、乳酸、乙酸中的一種或多種。

6.根據權利要求1所述的骨肽提取方法，其特征在于，步驟2中超聲處理時間為30-60s。

7.根據權利要求1所述的骨肽提取方法，其特征在于，步驟3中，微波處理時，反應器中的真空度為-43Kpa～-49Kpa。

8.根據權利要求1所述的骨肽提取方法，其特征在于，所述的步驟6具體為：通過透析處理得到分子量小于8000的外透液，將外透液真空濃縮；將濃縮液冷凍至4℃后，加入5倍濃縮液體積的-20℃的丙酮，靜置一段時間后過濾，并通過真空噴霧干燥得到骨肽。

9.根據權利要求8所述的骨肽提取方法，其特征在于，所述的噴霧干燥時，進風溫度控制在110-160℃，出風溫度控制在60-85℃。