[發明專利]一種血型抗原芯片及其在紅細胞意外抗體檢測中的應用有效
| 申請號: | 201710845503.2 | 申請日: | 2017-09-19 |
| 公開(公告)號: | CN107643409B | 公開(公告)日: | 2021-05-04 |
| 發明(設計)人: | 汪德清;楊璐;于曉波 | 申請(專利權)人: | 中國人民解放軍總醫院 |
| 主分類號: | G01N33/80 | 分類號: | G01N33/80;G01N33/543 |
| 代理公司: | 北京領科知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11690 | 代理人: | 張丹 |
| 地址: | 100039*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 血型 抗原 芯片 及其 紅細胞 意外 抗體 檢測 中的 應用 | ||
1.一種紅細胞意外抗體的鑒定或檢測方法,其特征在于,包括:
(1)將血型紅細胞膜抗原包被至載體,所述的血型紅細胞膜抗原能夠結合紅細胞意外抗體,所述的血型紅細胞膜抗原為從紅細胞分離得到的紅細胞膜,其通過包括如下步驟的方法制備得到:(1)取壓積紅細胞,加入生理鹽水于-20℃至-200℃冰凍,再于20℃-40℃融化;(2)離心,去上清,洗滌,得到的白色的沉淀物;所述的載體為聚苯乙烯微球,所述包被方法包括:將微球超聲重懸,將微球依次加入N-羥基硫代琥珀酰亞胺、碳二亞胺活化;向微球溶液中加入血型紅細胞膜抗原進行偶聯,所述的血型紅細胞膜抗原包被至載體的量為45μg/1.25×105個微球;
(2)使檢測樣品與包被至載體的抗原接觸,所述檢測樣品稀釋后再與包被至載體的抗原接觸,所述檢測樣品的稀釋倍數為1:30;
(3)加入標記有標記物的二抗,所述的標記有標記物的二抗為Cy3標記的抗人IgG抗體,所述的二抗加入濃度為2μg/ml;
(4)針對標記物進行信號檢測;
所述的血型紅細胞膜抗原包含有D、C、E、c、e、JKa、JKb、M、N、S、s、Kpa、Kpb、Lua、Lub、Fya、Fyb、K、k、Lea、Leb和P1中的一種或兩種以上的組合。
2.權利要求1所述的一種紅細胞意外抗體的鑒定或檢測方法,其特征在于,所述的信號檢測為熒光法檢測。
3.權利要求1所述的一種紅細胞意外抗體的鑒定或檢測方法,其特征在于,所述的信號檢測為在波長為532nm和635nm進行熒光檢測。
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