[發明專利]一種利用低濃度尿素制備鐵蛋白-多酚包埋物的方法

在審

• 申請號: 201710844770.8
• 申請日: 2017-09-15
• 公開（公告）號: CN109497541A
• 公開（公告）日: 2019-03-22
• 發明（設計）人: 楊瑞;劉玉茜;周中凱
• 申請（專利權）人: 天津科技大學
• 主分類號: A23L33/105
• 分類號: A23L33/105;A23L33/17;A23L29/00;A23P10/30
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本發明公開了一種利用低濃度尿素制備鐵蛋白?多酚包埋物的方法，包括以下步驟：將鐵蛋白溶液置于離心管中，添加尿素溶液，室溫避光誘導孵育；取天然多酚類物質，溶于蒸餾水；將多酚溶液和尿素誘導后的鐵蛋白溶液混合，4℃避光攪拌，將上述溶液于4℃層析柜中避光透析并過膜即得均勻的鐵蛋白?多酚包埋物溶液。最終產品是一種新型的鐵蛋白?天然多酚物質包埋物的制備方法，為包埋其它食源活性物質提供一種較為緩和、低成本、環保的方法借鑒，在食品、醫藥和化妝品領域具有很高的實際應用和推廣價值。

技術領域

一種利用低濃度尿素制備鐵蛋白-多酚包埋物的方法，屬于食品技術領域。

背景技術

植物多酚廣泛存在于植物體內，其應用領域廣泛，提取工藝成熟，生物活性功能眾多，包括抗氧化、抗腫瘤、抗老化、抗輻射以及預防心腦血管疾病等多種功能活性。目前，多酚已經應用到工業生產的許多領域，例如：食品天然著色劑、食品防腐劑、化妝品等。然而，由于多酚化合物具有活潑的酚羥基結構，在不適宜pH、高水分活度、光照、高溫等條件下易發生氧化、聚合、縮合等反應，從而導致穩定性的降低和生物活性的下降。另一方面，人體攝入的多種食物組分，如蛋白質、碳水化合物、脂類，往往也會對多酚的吸收產生明顯的影響。因此，探究如何保持多酚類物質的穩定性以及提高其生物利用度的方法，是目前食品營養領域研究的熱點和難題，一直備受國內外學者的關注。

鐵蛋白是一類廣泛存在于動物、植物及微生物中的天然鐵貯存蛋白。由于其獨特的球形空殼結構和可逆自組裝特性，可用于食源生物活性物質分子的載體化。鐵蛋白由24個亞基組成，每兩個亞基反向平行形成一組，構成一個近似正八面體，成4-3-2重軸對稱中空的球狀分子，每個鐵蛋白分子形成12個二重軸通道、8個三重軸通道和6個四重軸通道，其通道尺寸容易受到外部環境，如尿素、問題等因素的影響，從而導致尺寸的增大或縮小。外徑為12nm，內徑為8nm，厚度為2nm，8nm的空穴可容納4500個三價鐵離子。利用鐵蛋白的變性復性可逆自組裝性質，在蛋白變性體系中添加某種功能組分，那么復性時這些組分可能被包埋在鐵蛋白內部空腔內，從而實現了功能組分的鐵蛋白裝載。在食品和醫藥領域，利用鐵蛋白的可逆自組裝特性已成功地包埋原花青素、蘆丁等天然多酚物質。然而，必須注意的是，從極端酸性/ 堿性到中性階段的pH變化可能會影響活性物質的感官特性、儲存、生物活性和理化性質，甚至造成樣品污染和環境污染。因此，采用一種溫和的技術，在不破壞鐵蛋白納米籠的情況下包埋小分子，有助于這些問題的解決。我們在實驗過程中通過加入低濃度尿素的方法誘導鐵蛋白通道變大，使多酚分子通過擴大的通道包埋進鐵蛋白納米空腔內，從而制備出大小均一、穩定的納米顆粒包埋物。

以鐵蛋白、多酚類物質為原料，通過添加低濃度尿素誘導鐵蛋白通道變大的方式包埋多酚物質，制備出均勻分散的鐵蛋白-多酚包埋物，這種方法的應用在國內外未見公開報道，未見公開使用。

發明內容

本發明的目的之一是提供一種利用低濃度尿素制備鐵蛋白-多酚包埋物的方法。以鐵蛋白和多酚物質作為原料，利用低濃度尿素誘導鐵蛋白通道變大從而將多酚包埋進納米空腔里，制備出大小均一、穩定的鐵蛋白-多酚包埋物，以期提高多酚物質的穩定性，最終產品是一種新型的鐵蛋白-天然多酚物質包埋物的制備方法，為推廣多酚在食品中的應用以及為包埋其它食源活性物質、穩態化提供一種低成本、較為環保的方法借鑒。

本發明提供了一種新型的鐵蛋白-天然多酚物質包埋物的制備方法，包括以下步驟：將鐵蛋白溶液置于離心管中，添加尿素溶液，室溫避光誘導孵育；取天然多酚類物質，溶于蒸餾水；將多酚溶液和尿素誘導后的鐵蛋白溶液混合，4℃避光攪拌，將上述溶液于4℃層析柜中避光透析并過膜即得均勻的鐵蛋白-多酚包埋物溶液。

進一步的，所述鐵蛋白溶液的濃度為1.0μM，其pH值為6.8左右。

進一步的，在上述鐵蛋白溶液中加入濃度為20mM尿素溶液室溫避光誘導孵育。

進一步的，稱取多酚類物質溶解在蒸餾水中制備成濃度為1mM的母液。