[發明專利]用于檢測糖蛋白的基于分子印記聚合物的表面增強拉曼光譜傳感器及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201710841142.4
• 申請日: 2017-09-18
• 公開（公告）號: CN107782711B
• 公開（公告）日: 2020-09-04
• 發明（設計）人: 周學敏;李曉旭;徐磊;沈心;李昺之
• 申請（專利權）人: 南京醫科大學
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65;C08F222/20;C08F230/06
• 代理公司: 北京思創大成知識產權代理有限公司 11614
• 代理人: 尹慧晶

1.一種用于檢測糖蛋白的基于分子印記聚合物的表面增強拉曼光譜傳感器，其特征在于該傳感器的建立在于對糖蛋白特異性親和及選擇性捕獲的分子印記聚合物層和具有糖蛋白特異性親和作用的SERS探針的組合；

所述分子印記聚合物層是通過以下方法制備得到的：取功能單體，交聯劑，引發劑，致孔劑超聲混勻15~25min，滴涂于玻璃片，70~75゜C反應1~2h合成聚合物骨架，然后以甲醇和蒸餾水分別沖洗；將制備的聚合物骨架浸入模板分子糖蛋白溶液中，隨后用磷酸鹽緩沖液洗滌，加入含有多巴胺和過硫酸銨的磷酸鹽緩沖液；將模板分子固定的聚合物骨架置于3~5℃下10~12h，然后，用含有體積分數為25~35％乙腈的磷酸溶液洗滌得到分子印記聚合物層；

所述的功能單體、交聯劑、引發劑和致孔劑的重量比為1.8~2.2：7.3~7.7 ：0.09~0.12：33~35；所述的模板分子濃度為0.10~0.12mg mL^-1，多巴胺的濃度為1.8~2.2mg mL^-1，過硫酸銨的濃度為9~10mM，所述的功能單體為4-乙烯基苯硼酸，交聯劑為季戊四醇三丙烯酸酯，引發劑為2,2-偶氮二異丁腈，致孔劑為質量比為3:2的乙二醇和環己醇混合物；

所述SERS探針是通過以下方法制備得到的：將對巰基苯硼酸溶液加入到AuNPs膠體溶液中，室溫下攪拌。

2.一種權利要求1所述的用于檢測糖蛋白的基于分子印記聚合物的表面增強拉曼光譜傳感器的制備方法，其特征在于包括分子印記聚合物層的制備和SERS探針的制備；其中，分子印記聚合物層的制備步驟是在硼酸親和聚合物骨架上固定模板分子糖蛋白之后，在聚合物骨架表面上通過多巴胺的自聚合來制備；SERS探針的制備是SERS探針用硼酸修飾；

所述的用于檢測糖蛋白的基于分子印記聚合物的表面增強拉曼光譜傳感器的制備方法包括以下步驟：

a)分子印記聚合物層的制備：取功能單體，交聯劑，引發劑，致孔劑超聲混勻15~25min，滴涂于玻璃片，70~75゜C反應1~2h合成聚合物骨架，然后以甲醇和蒸餾水分別沖洗；將制備的聚合物骨架浸入模板分子糖蛋白溶液中，隨后用磷酸鹽緩沖液洗滌，加入含有多巴胺和過硫酸銨的磷酸鹽緩沖液；將模板分子固定的聚合物骨架置于3~5℃下10~12h，然后，用含有體積分數為25~35％乙腈的磷酸溶液洗滌得到分子印記聚合物層；

b)SERS探針的制備：將對巰基苯硼酸溶液加入到AuNPs膠體溶液中，室溫下攪拌；

其中，在步驟a) 中：所述的功能單體、交聯劑、引發劑和致孔劑的重量比為1.8~2.2：7.3~7.7 ：0.09~0.12：33~35；所述的模板分子濃度為0.10~0.12mg mL^-1，多巴胺的濃度為1.8~2.2mg mL^-1，過硫酸銨的濃度為9~10mM，其中，功能單體為4-乙烯基苯硼酸，交聯劑為季戊四醇三丙烯酸酯，引發劑為2,2-偶氮二異丁腈，致孔劑為質量比為3:2的乙二醇和環己醇混合物。

3.根據權利要求2所述的用于檢測糖蛋白的基于分子印記聚合物的表面增強拉曼光譜傳感器的制備方法，其特征在于在步驟a) 中所述的模板分子為酸性磷酸酶，或轉鐵蛋白，或辣根過氧化物酶中的一種或多種。

4.根據權利要求2中所述的用于檢測糖蛋白的基于分子印記聚合物的表面增強拉曼光譜傳感器的制備方法，其特征在于在步驟b) 中所述的對巰基苯硼酸溶液中對巰基苯硼酸濃度為20~22μM，攪拌時間為60~70 min。