[發明專利]一種水中銅綠微囊藻快速定量方法

在審

• 申請號: 201710834199.1
• 申請日: 2017-09-15
• 公開（公告）號: CN107727556A
• 公開（公告）日: 2018-02-23
• 發明（設計）人: 趙偉高;趙鵬;田一梅;金超;崔諾;郭蓉
• 申請（專利權）人: 天津大學
• 主分類號: G01N15/10
• 分類號: G01N15/10;G01N21/31
• 代理公司: 天津市北洋有限責任專利代理事務所12201
• 代理人: 吳學穎

1.一種水中銅綠微囊藻快速定量方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟一：建立校正曲線或回歸方程

配制一組不同濃度的銅綠微囊藻藻液，通過分光光度計分別在220、360、420、520、640、680nm波長處測定其吸光度，同時用血細胞板計數法對每個樣品的藻細胞進行精確計數，得到單位體積藻液中藻細胞數；分別測定空白樣品在220、360、420、520、640、680nm波長處的吸光度，根據吸光度和細胞濃度繪制校正曲線，或線性回歸得到對應波長處的回歸方程；

步驟二：銅綠微囊藻計數

將含銅綠微囊藻的待測樣品稀釋后，在與步驟一相同的條件下，采用分光光度計在特定波長處測定稀釋后藻液的吸光度，根據建立的吸光度和細胞濃度之間的校正曲線或回歸方程，計算得到待測樣品中銅綠微囊藻的細胞濃度。

2.根據權利要求1所述的水中銅綠微囊藻快速定量方法，其特征在于，步驟一中所述校正曲線或回歸方程的具體建立過程：

取一定量滅菌培養基培養的對數期的銅綠微囊藻，分別稀釋1、3、5、8、10、30、50、80、100、300、500、800、1000、3000、5000、8000倍，空白組加入滅菌的培養基，將稀釋后不同濃度的銅綠微囊藻藻液和空白組加入微孔板中，每組3-5個平行樣；通過分光光度計分別測定每個濃度的藻液在220、360、420、520、640、680nm波長處的吸光度，空白樣品的吸光度；同時用血細胞計數法對每個濃度的藻細胞精確計數，每個樣品重復3-5次，取平均值得到細胞濃度，在吸光度和細胞濃度之間建立校正曲線或回歸方程。

3.根據權利要求2所述的水中銅綠微囊藻快速定量方法，其特征在于，所述銅綠微囊藻的培養基為滅菌的BG-11、MA、M-11或HGZ培養基。

4.根據權利要求1所述的水中銅綠微囊藻快速定量方法，其特征在于，步驟二中所述含銅綠微囊藻的待測樣品稀釋后的藻液取3-5個平行樣，加入10ml石英比色皿中，依次采用分光光度計測定在220、360、420、520、640、680nm任一波長處的光度值，取平均值。