[發明專利]一種腫瘤酸度響應自噬誘導多肽及其制備方法和應用有效
| 申請號: | 201710831001.4 | 申請日: | 2017-09-15 |
| 公開(公告)號: | CN107686523B | 公開(公告)日: | 2021-05-14 |
| 發明(設計)人: | 丁國斌;李卓玉;孫俊清;楊鵬;李彬春 | 申請(專利權)人: | 山西大學 |
| 主分類號: | C07K19/00 | 分類號: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;A61K38/17;A61K47/64;A61P35/00;C12R1/19 |
| 代理公司: | 山西五維專利事務所(有限公司) 14105 | 代理人: | 張福增 |
| 地址: | 030006 山*** | 國省代碼: | 山西;14 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 腫瘤 酸度 響應 誘導 多肽 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種腫瘤酸度響應自噬誘導多肽,其特征在于,氨基酸序列為SEQ ID NO:1。
2.編碼權利要求1所述腫瘤酸度響應自噬誘導多肽的基因,其核苷酸序列為SEQ IDNO:2。
3.一種載體,含有權利要求2所述的基因。
4.一種工程菌,含有權利要求3所述的載體。
5.如權利要求1所述的腫瘤酸度響應自噬誘導多肽的制備方法,主要包括以下步驟:化學合成pHLIP和Beclin 1活性片段的基因,通過限制性酶切位點將其連接到pET-32a表達載體上,獲得重組質粒pET-32a-pHLIP-Beclin 1;將其轉化到大腸桿菌BL21(DE3),篩選獲得工程菌pET-32a-pHLIP-Beclin 1/BL21(DE3);將該工程菌接種到含氨芐青霉素的LB培養液中,37 ℃振蕩培養至A 600nm為0.6-0.8,加入IPTG使終濃度為1 mM,16℃過夜誘導表達,收集菌體,超聲破碎離心收集上清,經親和層析分離純化獲得目的蛋白。
6.如權利要求1所述的腫瘤酸度響應自噬誘導多肽在制備靶向抗癌藥物中的應用,所述的癌為存在Beclin 1基因缺失性突變的卵巢癌、乳腺癌或前列腺癌。
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