[發明專利]一種短小芽孢桿菌及其篩選方法、菌劑的制備方法和應用

有效

• 申請號: 201710821762.1
• 申請日: 2017-09-13
• 公開（公告）號: CN108795794B
• 公開（公告）日: 2022-02-08
• 發明（設計）人: 楊德廉;崔志軍;高傳軍;張英華;王先偉;臧傳江;郭全偉;趙湘江;劉宏;高政緒;王德權;席元肖;楊少杰;劉振宇;孔維建
• 申請（專利權）人: 濰坊市煙草專賣局
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C05F11/08;C12R1/07
• 代理公司: 常州佰業騰飛專利代理事務所(普通合伙) 32231
• 代理人: 張宇

本發明屬于微生物技術領域，具體涉及一種短小芽孢桿菌及其應用，該菌株的保藏號為CGMCC No.13448，所述短小芽孢桿菌命名為短小芽孢桿菌BP16，其16S rDNA序列如SEQ ID No：1所示，該短小芽孢桿菌具有很好的解鉀作用，對人、畜、農作物安全，對環境友好。

技術領域

本發明屬于微生物技術領域，具體涉及一種短小芽孢桿菌及其篩選方法、菌劑的制備方法和應用。

背景技術

土壤微生物和植物根系形成一個穩定的動態系統，在這個系統中，他們相互作用，相互影響，植物根系為土壤微生物提供營養，土壤微生物又能提高土壤肥力，促進植物的生長發育，因而土壤、植物和微生物在農業生產中相互作用，且有著密切聯系。鉀是作物生長發育所必需的大量營養元素，研究土壤中鉀的有效化對提高土壤肥力有著極其重要的意義。篩選研究不同土壤中的解鉀細菌對于開發微生物菌種資源，提高土壤肥力，增進農產品品質，改善生態環境，具有重要意義。

現有大多數研究都集中于單一功能生物因子或同一功能的不同生物因子的功能菌群的研究，對多功能土壤細菌菌株篩選研究甚少。

發明內容

本發明主要提供了一種短小芽孢桿菌，具有很好的解鉀作用，對人、畜、農作物安全，對環境友好。其技術方案如下：

本發明提供的短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)，已于2016年12月14日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(地址為：北京市朝陽區北辰西路1號院3號)，保藏登記號為CGMCC No.13448。短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)命名為短小芽孢桿菌BP16。

所述短小芽孢桿菌的菌學特征：革蘭氏陽性菌，桿狀，圓末端。在LB培養基上培養，菌落顏色為乳白色，四周呈鋸齒狀，菌落平整無隆起，無同心圈，無光澤。

所述短小芽孢桿菌16S rDNA序列表如序列表SEQ ID NO.1所示，與genbank上已報道序列進行對比，最終確定菌株為短小芽孢桿菌。

所述短小芽孢桿菌的篩選方法為：(1)取10g煙田土壤樣品溶于100ml無菌水中，震蕩20min，按10倍稀釋法配制土壤懸液，選取10^-3和10^-5兩個梯度在NA平板中涂布，每個梯度設置4個重復，置于28℃恒溫培養箱中培養72h，挑取單菌落在NA平板中劃線培養，得芽孢桿菌；(2)所得細菌接種到解鉀初篩培養基中，28℃培養120h，得到具有解鉀活性菌株，轉到LB平板上培養保存。

一種短小芽孢桿菌菌劑，由短小芽孢桿菌經活化、種子培養、發酵后得到。其中，優選的，所述活化的方法為將短小芽孢桿菌接種于LB培養基中，于28℃培養24h。所述種子培養的方法為將活化后的短小芽孢桿菌接種于培養基中，于28℃、150r/min振蕩培養12h。所述發酵的方法為將培養后的短小芽孢桿菌以1％體積比接種于培養基中，于28℃、150r/min振蕩培養72h，得到的菌劑稀釋100倍后使用。

短小芽孢桿菌可以應用為解鉀和促進植物生長使用，制成的短小芽孢桿菌菌劑可以促進植物生長使用。

與現有技術相比，本發明具有以下優點：

(1)本發明中的短小芽孢桿菌是一株煙田土壤細菌，對人、畜、農作物安全，對環境友好；

(2)短小芽孢桿菌具有很好的解鉀作用，所述解鉀指的是將植物不能利用的鉀(例如鉀長石中礦物質形成的鉀)轉變成植物所能利用的可溶性鉀，對提高土壤肥力有著極其重要的意義，具有促進植物生長的作用，所述植物為小白菜或煙草。所述促進植物生長體現為促進葉長、葉寬、葉片數、莖粗和根總長度指數中至少一項增加，對于植物栽培尤其是經濟植物的栽培具有重大應用價值。

附圖說明

圖1為短小芽孢桿菌BP16在LB培養基上生長的菌落形態；